Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-ZAP70-Y493 - P43403

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ZAP70

• ZAP70 (Tirosina-proteína quinase ZAP-70), também conhecida como tirosina quinase relacionada à Syk, é uma proteína citoplasmática de 70 kDa pertencente à família de quinases Syk.
• Desempenha um papel fundamental na imunidade adaptativa, regulando a sinalização do receptor de células T e de células B, afetando motilidade, adesão, expressão de citocinas e desenvolvimento de timócitos.
• Após o engajamento do TCR, a ZAP70 é recrutada para os motivos ITAM fosforilados de CD3E e CD247/CD3Z na membrana plasmática, o que alivia sua autoinibição e leva à ativação (PubMed:7509083). Referências relacionadas: PMID:7509083
• A ZAP70 ativada fosforila proteínas adaptadoras-chave LAT e LCP2, montando complexos de sinalização que impulsionam a produção de linfocinas, a proliferação e a diferenciação de células T.
• A ZAP70 também modula a dinâmica do citoesqueleto, adesão e mobilidade das células T, e participa na regulação negativa do TCR, promovendo a internalização e degradação de CD247/CD3Z via CBL e proteínas adaptadoras SLA/SLA2.
• A localização subcelular é principalmente citoplasmática e na membrana celular, com expressão restrita a células T, células natural killer, timócitos precoces e células pro/pré-B.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (crítica para a atividade), acetilação e ubiquitinação; a proteína apresenta domínios SH2, um domínio quinase de ligação a ATP e múltiplos sítios de fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo tem como alvo o sítio de fosforilação em Tyr493, um resíduo crítico para a ativação da ZAP70; considere o uso de inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar o epítopo fosfo.
• Para IF/ICC, valide a especificidade da coloração usando um bloqueio com peptídeo não fosforilado ou tratando as células com uma fosfatase para confirmar a perda do sinal.
• Este anticorpo é adequado para ELISA; ao adaptar para outros imunoensaios, faça titulação e teste em sua matriz de amostra específica para garantir linearidade e sensibilidade.

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