Anticorpo policlonal coelho PIAS3 para WB, IHC-P, ELISA - Q9Y6X2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PIAS3

• PIAS3 (Proteína Inibidora do STAT3 Ativado) é uma ligase E3 SUMO-proteína e um fator de ancoragem SUMO que estabiliza a interação entre a enzima E2 UBE2I e os substratos para catalisar a conjugação SUMO. Referências relacionadas: PMID:21965678, PMID:9388184
• Funciona como um co-regulador transcricional em múltiplas vias de sinalização, notadamente inibindo a atividade de ligação ao DNA do STAT3 e suprimindo o crescimento celular mediado pelo STAT3.
• PIAS3 aumenta a sumoilação da proteína associada à metástase MTA1 e pode contribuir para a sumoilação seletiva de paralogos desta proteína. Referências relacionadas: PMID:21965678
• Sumoila CCAR2 (DBC1), o que facilita a interação entre CCAR2 e a desacetilase SIRT1, conectando a modificação SUMO às redes regulatórias de desacetilação. Referências relacionadas: PMID:25406032
• PIAS3 pode diminuir a sumoilação de ZFHX3 (ATBF1) impedindo sua colocalização com SUMO1 no núcleo, modulando assim a função repressora transcricional de ZFHX3. Referências relacionadas: PMID:24651376
• A proteína localiza-se predominantemente no citoplasma, núcleo e speckles nucleares, consistente com seus papéis na sinalização subnuclear e regulação da transcrição.
• PIAS3 é amplamente expressa em tecidos humanos e contém um domínio de dedo de zinco essencial para sua atividade de ligase e reconhecimento de substrato.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno tem como alvo a região C-terminal (a.a. 452–628) do PIAS3 humano; o anticorpo pode reconhecer múltiplos isoformas ou formas pós-tradução modificadas. Considere verificar a especificidade para o seu isoforma de interesse por meio de alinhamento de sequência e mapeamento de epítopo se a reatividade cruzada com membros da família PIAS for uma preocupação.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 68 kDa; no entanto, espécies sumoiladas, fosforiladas ou com outras modificações pós-tradução podem gerar bandas adicionais em migrações mais altas ou aberrantes. Valide em seu sistema de amostra usando controles positivos e negativos apropriados.
• Na imuno-histoquímica (parafina), métodos de recuperação de antígeno, como recuperação de epítopo induzida por calor (HIER), podem ser necessários para detecção ideal. Dada a localização citoplasmática e nuclear prevista, confirme os padrões de coloração com dados de expressão conhecidos.
• Para ELISA, o imunógeno recombinante ou a proteína PIAS3 de comprimento total podem ser usados como antígeno de captura. Otimize as concentrações de revestimento e as condições do ensaio, e inclua antígenos de controle apropriados e controles de anticorpo secundário para garantir a especificidade.

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