Anticorpo Policlonal de Coelho PIP5K1A para WB, IHC-P, ELISA - Q99755

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PIP5K1A

• O PIP5K1A codifica a fosfatidilinositol 4-fosfato 5-quinase alfa tipo I de 68 kDa (PIP5KIalpha), uma quinase de lipídeos central para a sinalização de fosfoinositídeos.
• Catalisa a conversão de fosfatidilinositol 4-fosfato (PI4P) em fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2), um segundo mensageiro lipídico crítico. Esta atividade é a via predominante para a síntese de PIP2.
  Referências relacionadas: PMID:21477596, PMID:22942276, PMID:8955136
• O PIP2 serve como precursor para os segundos mensageiros inositol 1,4,5-trisfosfato (IP3), diacilglicerol (DAG) e fosfatidilinositol-3,4,5-trisfosfato (PIP3), mediando, assim, diversas cascatas de transdução de sinais.
  Referências relacionadas: PMID:19158393, PMID:20660631
• Através da produção de PIP2, o PIP5K1A regula a dinâmica do citoesqueleto de actina, a adesão celular, a motilidade, o ondulação da membrana e a formação de adesões focais. É necessário para fagocitose, adesão de plaquetas, diferenciação de queratinócitos e translocação do transportador de glicose induzida por insulina.
• No núcleo, o PIP5K1A ativa a atividade adenililtransferase da TUT1 em speckles nucleares, regulando, assim, a poliadenilação de mRNA de um conjunto selecionado de mRNAs.
  Referências relacionadas: PMID:18288197
• Localiza-se na membrana celular, citoplasma, núcleo, speckles nucleares e projeções celulares, como ondulações e lamelipódios, refletindo suas funções multifacetadas.
• Altamente expresso no coração, placenta, músculo esquelético, rim e pâncreas, com níveis mais baixos no cérebro, pulmão e fígado.
• Listado como uma proteína fosforilada e contendo ligações isopeptídeo com sítios de conjugação semelhantes à ubiquitina; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 231‑500 do PIP5K1A humano, uma região que provavelmente contém epítopos conservados; espera-se reatividade cruzada com camundongo, apoiada pela homologia de sequência neste segmento. Considere o alinhamento de sequência para confirmar a reatividade com outras espécies.
• Para Western blotting, prevê-se uma banda próxima de 63 kDa. Use lisados de tecidos com alta expressão de PIP5K1A (por exemplo, coração, músculo esquelético) como controles positivos e inclua marcadores de peso molecular para verificar o tamanho da banda.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), padrões de colorização de membrana, citoplasmática e nuclear podem ser observados dependendo do tipo de célula e do contexto. Otimize a recuperação de antígeno e inclua controles negativos relevantes (por exemplo, sem anticorpo primário ou soro pré-imune) para avaliar a especificidade.
• O ELISA pode ser empregado para titulação de anticorpos ou detecção de antígenos. Valide o ensaio usando proteína PIP5K1A recombinante ou lisados celulares e determine as condições ideais de revestimento e detecção.
• Como um anticorpo policlonal, ele pode detectar múltiplas isoformas ou produtos de degradação; confirme a especificidade por experimentos de knockdown ou superexpressão em seu sistema modelo.

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