Anticorpo Monoclonal de Coelho PIWIL4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z3Z4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PIWIL4

• PIWIL4 (também designada HIWI2 ou MIWI2) é uma proteína semelhante a Piwi e membro da família Argonaute, central no silenciamento gênico mediado por piRNA.
• Essencial para a espermatogênese, reprimindo elementos transponíveis e mantendo a integridade da linhagem germinativa via via piRNA (Por similaridade).
• Atua no núcleo para silenciar transposons ativos, engajando-se em transcrições nascentes de elementos transponíveis e direcionando metilação do DNA e repressão (Por similaridade).
• Carece de atividade endonuclease, atuando como um componente 'incompetente para clivagem' no ciclo de amplificação (ping-pong) de piRNA, carregando piRNAs clivados da PIWIL2 para direcionar-se a loci genômicos de transposons (Por similaridade).
• Induz metilação 'Lys-9' da histona H3 em alguns loci, contribuindo para o silenciamento epigenético. Referências relacionadas: PMID:17544373
• Expressa de forma ubíqua em tecidos humanos, com detecção na retina, epitélio pigmentar da retina e vários tipos celulares. Referências relacionadas: PMID:17544373 PMID:22483988 PMID:25038252 PMID:28025795 PMID:28711973
• Em células somáticas, localiza-se no núcleo e citoplasma; mantém a integridade do epitélio retiniano via sinalização Akt/GSK3alfa/beta, e a superexpressão promove proliferação oncogênica. Referências relacionadas: PMID:28025795 PMID:22483988

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 272-383 da PIWIL4 humana, uma região provavelmente conservada entre humano, camundongo e rato com base na reatividade cruzada relatada; considere usar este anticorpo para detectar PIWIL4 nessas espécies.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em torno de 97kDa; no entanto, a migração real pode variar devido a modificações pós-traducionais ou variantes de isoforma. Inclua lisados de controle positivo apropriados.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), espere coloração tanto nuclear quanto citoplasmática, consistente com a distribuição subcelular da PIWIL4; otimize as condições de fixação e permeabilização.
• Para ELISA, use proteína PIWIL4 recombinante (ou o imunógeno) como padrão para estabelecer os parâmetros do ensaio; observe que o anticorpo pode reconhecer formas proteicas desnaturadas e nativas, pois foi gerado contra uma proteína de fusão recombinante.
• Valide a especificidade do anticorpo no sistema de amostra relevante (por exemplo, usando controles de knockdown ou knockout) para confirmar o reconhecimento do alvo.

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