mAb de coelho contra PKC alfa para IF/ICC, ELISA - P17252

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da proteína quinase C alfa

• A proteína quinase C alfa (PKCα), codificada pelo gene PRKCA (alcunhas: PKCA, PRKACA), é uma serina/treonina-proteína quinase ativada por cálcio e dependente de fosfolipídios e diacilglicerol (DAG). Ela pertence à família de quinases PKC, que desempenha papéis fundamentais em diversas vias de transdução de sinais.
• A PKCα está envolvida na regulação positiva e negativa da proliferação celular, apoptose, diferenciação, migração, adesão, tumorigênese, hipertrofia cardíaca, angiogênese, função plaquetária e inflamação. Ela fosforila diretamente alvos como RAF1, BCL2, CSPG4, TNNT2/CTNT e ativa as cascatas de sinalização MAPK/ERK e RAP1GAP.
• Na biologia do câncer, a PKCα é altamente expressa em vários tumores, incluindo gliomas e cânceres de mama, nos quais pode atuar como promotora tumoral. Ela apresenta funções antiapoptóticas ao suprimir a ativação de IGFBP3 mediada por p53 e fosforilar BCL2. Nas células de glioma, promove o crescimento celular por meio de RAF1/MAPK/ERK.
• A PKCα regula a dinâmica do citoesqueleto e a migração celular. Por exemplo, ela fosforila CSPG4, induzindo a formação de lamelipódios e a polarização celular. Durante a migração de células T CD4+ induzida por quimiocinas, a PKCα fosforila DOCK8, levando à ativação de CDC42 e ao aumento da motilidade. Referências relacionadas: PMID:28028151
• A localização subcelular da PKCα é dinâmica: ela transita entre o citoplasma, a membrana celular, a membrana mitocondrial e o núcleo, dependendo do estímulo. Esse tráfego é fundamental para suas funções de sinalização em processos como a diferenciação de macrófagos e a cicatrização de feridas.
• No sistema cardiovascular, a PKCα regula negativamente a contratilidade miocárdica ao fosforilar a troponina T cardíaca (TNNT2/CTNT), o que reduz a atividade ATPase da actomiosina e a sensibilidade ao cálcio. Ela também promove a hipertrofia cardíaca por meio da sinalização MAPK/ERK e é essencial para a angiogênese, mediando a migração de células endoteliais e a sinalização dependente de VEGFA.
• A PKCα está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que modulam sua atividade e suas interações. Ela também é um proto-oncogene e uma entrada do proteoma de referência (palavras-chave do UniProt: Acetylation, Apoptosis, ATP-binding, Calcium, Cell adhesion, Cell membrane, Cytoplasm, Direct protein sequencing, Kinase, Membrane, Metal-binding, Mitochondrion, Nucleotide-binding, Nucleus, Phosphoprotein, Proteomics identification, Proto-oncogene, Reference proteome, Repeat, Serine/threonine-protein kinase, Transferase, Zinc, Zinc-finger).
• A PKCα fosforila KLHL3 em resposta à angiotensina II, afetando a sinalização de WNK4 e a homeostase iônica. Ela também ativa LRRK1, que posteriormente fosforila proteínas RAB para regular o tráfego intracelular. Referências relacionadas: PMID:25313067 PMID:36040231

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado é a proteína PKC alfa humana recombinante. Esse design geralmente produz anticorpos que reconhecem as conformações nativas da proteína. Para IF/ICC, considere otimizar as condições de fixação/permeabilização para preservar a localização subcelular do alvo (citoplasma, membrana, núcleo).
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para detectar PKCα em lisados celulares ou amostras de proteína purificada. Combine-o com um sistema de detecção adequado e valide-o no sistema de amostra relevante para garantir a especificidade.
• A ativação da PKCα frequentemente envolve translocação; portanto, em experimentos de IF/ICC, a estimulação com agonistas como PMA pode revelar padrões dinâmicos de redistribuição. Inclua sempre controles apropriados.
• A reatividade cruzada foi relatada para humanos; verifique a reatividade com outras espécies, se necessário.

CamelBio: sua ponte de fornecimento completa

A CamelBio oferece a fabricantes de diagnósticos, laboratórios e institutos de pesquisa acesso completo e integrado a matérias-primas para IVD, serviços técnicos e consultoria. Este anticorpo monoclonal contra PKC alfa faz parte de nosso amplo portfólio de reagentes de anticorpos validados para aplicações em sinalização celular e pesquisa oncológica. Quer você precise de pares de anticorpos otimizados, anticorpos monoclonais/policlonais, reagentes auxiliares em grandes quantidades ou fornecimento de matérias-primas para alvos raros, a CamelBio apoia seu desenvolvimento do conceito à clínica.