Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-RAB10 para WB, IF/ICC, ELISA - P61026

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de RAB10

• A proteína Rab-10 relacionada a Ras (RAB10) é uma pequena GTPase pertencente à família Rab de interruptores moleculares que regulam o tráfego intracelular de membranas. Ela alterna entre uma forma inativa ligada a GDP e uma forma ativa ligada a GTP, recrutando proteínas efetoras para controlar a formação, o movimento, o ancoramento e a fusão de vesículas. Referências relacionadas: PMID:21248164

• RAB10 está predominantemente envolvida no transporte biossintético do aparelho de Golgi para a membrana plasmática. Ela regula a entrega de vesículas enriquecidas com o transportador de glicose SLC2A4/GLUT4, do TLR4 para a superfície celular, e apoia o transporte assimétrico de proteínas, influenciando, assim, a homeostase da glicose e a imunidade inata.

• Em células polarizadas, RAB10 medeia o tráfego basolateral a partir da rede trans-Golgi. Em neurônios, contribui para a axonogênese ao direcionar o tráfego vesicular de membranas em direção à membrana plasmática axonal. Referências relacionadas: PMID:16641372

• RAB10 participa da dinâmica do retículo endoplasmático (RE), controlando a formação de túbulos ao longo dos microtúbulos e a fusão de túbulos. Também desempenha um papel na maturação dos fagossomos e na via de reciclagem basolateral. Referências relacionadas: PMID:23263280

• Juntamente com LRRK2, RAB8A e RILPL1, RAB10 regula a ciliogênese. A fosforilação no Thr-73 pela LRRK2 promove a ligação à RILPL1, inibindo a formação de cílios. Referências relacionadas: PMID:30398148

• RAB10 é direcionada aos lisossomos sob estresse após a fosforilação por LRRK2, promovendo a liberação extracelular do conteúdo lisossomal por meio dos efetores EHBP1 e EHNP1L1. Ela também facilita a exportação de um subconjunto de proteínas neossintetizadas por meio de uma via endossomal dependente de Rab8-Rab10-Rab11. Referências relacionadas: PMID:30209220, PMID:32344433

• A proteína está localizada em vários compartimentos de membrana, incluindo vesículas citoplasmáticas, Golgi, rede trans-Golgi, endossomos (de reciclagem e fagossomos), RE, lisossomos e o corpo basal do cílio. É expressa no hipocampo, em neutrófilos e nos testículos.

• RAB10 sofre prenilação para ancoragem à membrana e sabe-se que é fosforilada, acetilada e ubiquitinada. Está implicada na neurodegeneração e na patogênese microbiana, pois promove a replicação de Legionella pneumophila ao remodelar os vacúolos em compartimentos semelhantes ao RE.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 101–200 da RAB10 humana. Essa região central é conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que é consistente com a reatividade cruzada relatada. Ao utilizar este anticorpo em Western blot, espera-se uma banda específica em torno de 23 kDa; considere utilizar lisados celulares positivos e negativos apropriados para validar o desempenho.
• Para imunofluorescência/ICC, RAB10 apresenta uma distribuição pontilhada consistente com sua associação a vesículas citoplasmáticas, ao Golgi e aos endossomos. As condições de permeabilização e fixação podem precisar ser otimizadas para preservar esse padrão. A coloração conjunta com marcadores de organelas pode ajudar a confirmar a especificidade.
• O anticorpo também é adequado para ELISA. Como em qualquer imunoensaio, considere titular o anticorpo para determinar as concentrações de trabalho ideais para o seu sistema de amostras específico.
• Observe que RAB10 pode ser fosforilada (por exemplo, pela LRRK2), o que pode afetar a detecção caso o epítopo esteja mascarado. Verifique a reatividade nas condições experimentais relevantes.

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