Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-CD8a para Citometria de Fluxo - P01732

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CD8a

• A CD8a (glicoproteína de superfície de células T cadeia alfa CD8) é uma proteína transmembrana também conhecida como antígeno de diferenciação de linfócitos T T8/Leu-2. É codificada pelo gene CD8A (Gene ID: 925) e desempenha um papel fundamental na imunidade adaptativa.
• Nas células T, a CD8a funciona como um co-receptor para moléculas de MHC classe I. Ela se liga simultaneamente ao receptor de células T (TCR) e ao MHC classe I em células apresentadoras de antígeno, levando ao recrutamento da tirosina quinase LCK. Isso inicia cascatas de sinalização intracelular que promovem a ativação de linfócitos T citotóxicos (CTL), produção de citocinas e eliminação de células-alvo.
• A CD8 pode existir como um heterodímero ligado por dissulfeto com a CD8b (alfa/beta) ou como um homodímero de CD8a. A forma homodimérica é encontrada em subconjuntos de células natural killer (NK), células T de memória, linfócitos intraepiteliais, monócitos e células dendríticas.
• Em células NK, os homodímeros de CD8a facilitam a conjugação com e a lise de células-alvo, e promovem a sobrevivência e diferenciação de linfócitos ativados em células T CD8 de memória.
• Subcelularmente, a CD8a localiza-se na membrana celular e também é secretada. Contém domínios de peptídeo sinal, transmembrana e semelhantes à imunoglobulina.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, palmitoilação e formação de ligações dissulfeto intramoleculares, que são essenciais para sua estabilidade e função.
• Expressão tecidual: em células T derivadas do timo geralmente como o heterodímero alfa/beta; em células dendríticas plasmacitoides após estimulação pelo vírus herpes simplex-1; e em vários subconjuntos de células imunológicas como homodímeros.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo está diretamente conjugado ao , eliminando a necessidade de um anticorpo secundário em fluxos de trabalho de citometria de fluxo. Inclua controles de isotipo apropriados e discriminação de células vivas/mortas em seu painel.
• Prepare suspensões de células únicas a partir de amostras humanas ou de macaco cinomolgo frescas ou devidamente criopreservadas. O bloqueio de receptores Fc é recomendado para reduzir a ligação inespecífica.
• O imunogênio corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 22–182), garantindo o reconhecimento da forma nativa ligada à membrana. Valide a especificidade usando populações celulares positivas (ex.: PBMCs humanos) e negativas conhecidas.
• Os múltiplos pesos proteicos relatados (21, 25, 30 kDa) provavelmente refletem glicosilação diferencial ou isoformas. Confirme o padrão de banda esperado em seu tipo celular alvo ao usar técnicas complementares como Western blotting.
• Embora projetado principalmente para citometria de fluxo, a adequação para aplicação cruzada (ex.: ICC, IHC) pode ser viável; testes piloto sob suas condições específicas são aconselhados.

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