Anticorpo Monoclonal ABflo 488 de Coelho anti-Humano C5AR1/CD88 para Citometria de Fluxo - P21730

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do C5AR1/CD88

• O C5AR1/CD88 é um membro da família de receptores acoplados à proteína G (GPCR) e atua como receptor para a anafilatoxina C5a, um potente peptídeo quimiotático e inflamatório. Referências relacionadas: PMID:10636859 PMID:15153520 PMID:1847994
• Após a ligação ao C5a, o receptor estimula a quimiotaxia, a liberação de enzimas granulares, a mobilização de cálcio intracelular e a produção de ânion superóxido, impulsionando respostas imunes inatas. Referências relacionadas: PMID:10636859 PMID:15153520 PMID:1847994
• A interação ligante-receptor envolve dois locais distintos: um local de alta afinidade no terminal N extracelular e um segundo local dentro da região transmembranar que desencadeia eventos de sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:7622471 PMID:8182049 PMID:9553099
• A sinalização é mediada principalmente pelo acoplamento às proteínas G(i)/G(o) (GNAI1 ou GNAO1), levando à inibição da adenilato ciclase e modulação dos níveis intracelulares de cAMP. Referências relacionadas: PMID:36806352 PMID:37852260
• Subcelularmente, o C5AR1 está predominantemente localizado na membrana celular, mas também pode ser encontrado em vesículas citoplasmáticas após a internalização induzida por agonista.
• Modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, fosforilação, sulfatação e formação de pontes dissulfeto, são cruciais para o dobramento adequado do receptor, ligação ao ligante e transdução de sinal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo é um monoclonal de coelho conjugado com ABflo 488, permitindo a detecção direta por fluorescência em citometria de fluxo sem a necessidade de um anticorpo secundário. Otimize os protocolos de coloração para amostras humanas de células vivas ou fixadas que expressem C5AR1.
• Dado que o imunógeno é um peptídeo sintético dentro da região N-terminal (aa 1–100), considere usar o mesmo peptídeo como controle de bloqueio para confirmar a especificidade da coloração em sua configuração experimental.
• A reatividade humana é confirmada; se for necessária reatividade cruzada com outras espécies, valide de forma independente usando linhagens celulares apropriadas ou células primárias.
• Como um GPCR, o C5AR1 pode sofrer internalização rápida após a estimulação pelo ligante; para detectar a expressão na superfície, realize a coloração a 4°C ou na presença de azida sódica para inibir o turnover do receptor.
• Embora validado apenas para citometria de fluxo, o anticorpo pode ser adequado para outras aplicações (por exemplo, imunofluorescência, imunoprecipitação) com a otimização e controles experimentais adequados.

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