Coelho anti-Humano Calreticulina Anticorpo Monoclonal para FC (intra) - P27797

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Calreticulina

• A calreticulina é uma chaperona de ligação de cálcio altamente conservada, também conhecida como CRP55, Calregulina, ERp60, HACBP ou grp60. É o produto do gene CALR em humanos (ID do Gene: 811).
• No retículo endoplasmático, a calreticulina atua como uma chaperona do tipo lectina que promove o dobramento, a montagem oligomérica e o controle de qualidade de glicoproteínas nascentes através do ciclo calreticulina/calnexina. Interage transitoriamente com quase todas as glicoproteínas monoglicosiladas sintetizadas no RE. Referências relacionadas: PMID:7876246
• Para além do RE, a calreticulina interage com o domínio de ligação ao DNA do recetor nuclear NR3C1 e medeia a sua exportação nuclear, ligando a proteína à regulação transcricional. Referências relacionadas: PMID:11149926
• A calreticulina está implicada na biologia reprodutiva, onde participa na regulação da expressão de genes maternos e pode contribuir para a maturação do oócito através da homeostase de cálcio. Em oócitos não ativados, está presente nos grânulos corticais e é exocitada durante a reação cortical para ajudar a prevenir a poliespermia.
• A nível subcelular, a calreticulina encontra-se predominantemente no lúmen do retículo endoplasmático, mas também pode localizar-se no citosol, espaço extracelular, superfície celular, retículo sarcoplasmático e vesículas secretoras, como grânulos corticais e citolíticos.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, hidroxilação e formação de pontes dissulfeto. Possui um péptido sinal, motivos repetitivos e é categorizada sob várias palavras-chave: chaperona, cálcio, ligação de metais (zinco), glicoproteína, lectina, entre outras.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos aminoácidos 335–417 da calreticulina humana, uma região C‑terminal distinta do péptido sinal N‑terminal e dos domínios de chaperona. Este design pode permitir a deteção da calreticulina total, independentemente do estado de retenção no RE ou secreção.
• Dado que a calreticulina reside principalmente no lúmen do RE, a citometria de fluxo intracelular (FC intra) requer a fixação e permeabilização celular. Otimize as condições de permeabilização (por exemplo, usando saponina ou metanol) para garantir o acesso do anticorpo, preservando a reatividade do epítopo.
• O é um fluoróforo vermelho distante que permite a multiplexagem com outros marcadores intracelulares, minimizando a sobreposição espectral. Titule o anticorpo para determinar a relação ótima sinal-ruído para o seu sistema experimental específico.
• Considere usar este anticorpo para investigar o stress do RE, a dinâmica do controlo de qualidade de proteínas ou eventos de translocação da calreticulina em modelos celulares humanos. Como em qualquer coloração intracelular, inclua os controlos apropriados (células não estimuladas, controlos de isótipo e fluorescência menos um) para validar a especificidade.

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