Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD100/SEMA4D para IF/ICC, FC - Q92854

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Semaforina-4D

• A Semaforina-4D (CD100, SEMA4D) é um receptor de superfície celular e uma proteína secretada pertencente à família das semaforinas, com splicing alternativo produzindo múltiplas isoformas. Desempenha um papel fundamental na sinalização célula-célula através de interações com os receptores PLXNB1 e PLXNB2. Referências relacionadas: PMID:20877282
• No sistema nervoso, a SEMA4D regula o desenvolvimento de sinapses GABAérgicas e promove a formação de sinapses inibidoras de maneira dependente de PLXNB1. Modula a complexidade e a arborização de neuritos em neurônios do hipocampo ativando PLXNB1 e RHOA. Referências relacionadas: PMID:19788569
• A SEMA4D promove a migração de células granulares do cerebelo e induz a migração de células endoteliais via via PTK2B/PYK2, SRC e PI3K-AKT. Referências relacionadas: PMID:16055703
• No sistema imunológico, a SEMA4D induz a agregação de células B e aumenta sua viabilidade in vitro, destacando suas funções imunomoduladoras. Referências relacionadas: PMID:8876214
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo N-glicosilação e fosforilação, e contém ligações dissulfeto essenciais para sua integridade estrutural. Palavras-chave indicam que é uma glicoproteína transmembrana, proteína de desenvolvimento e fosfoproteína relacionada à neurogênese.
• Subcelularmente, a SEMA4D está localizada na membrana celular e pode ser secretada, consistente com seu duplo papel como receptor de superfície e ligante solúvel.
• Os tecidos com alta expressão incluem músculo esquelético, linfócitos do sangue periférico, baço e timo; expressão mais baixa é detectada em testículos, cérebro, rim, intestino delgado, próstata, coração, placenta, pulmão e pâncreas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região extracelular (aminoácidos 22-734) da SEMA4D humana, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer tanto as formas ligadas à membrana quanto as secretadas. Para IF/ICC, a permeabilização pode não ser estritamente necessária se o alvo for a SEMA4D de superfície, mas considere uma permeabilização suave para acessar epítopos intracelulares, se necessário.
• Este conjugado permite a detecção direta por fluorescência, minimizando etapas com anticorpos secundários. Para citometria de fluxo, confirme a titulação ideal do anticorpo e inclua controles de isotipo apropriados para garantir coloração específica na população celular alvo.
• Ao investigar a função da SEMA4D em ensaios de sinalização celular ou migração, valide a reatividade do anticorpo nas linhagens celulares humanas relevantes (por exemplo, linfócitos, células neuronais) nas condições experimentais utilizadas.

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