Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD141/Trombomodulina para Citometria de Fluxo - P07204

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Trombomodulina

• A trombomodulina (CD141/BDCA-3, também conhecida como fetomodulina) é um receptor transmembrana expresso em abundância nas células endoteliais vasculares, com função na hemostasia, coagulação, fibrinólise, inflamação e angiogênese. Referências relacionadas: PMID:10761923
• Ela atua como cofator para a ativação da proteína C mediada pela trombina na superfície endotelial, iniciando a via anticoagulante. Referências relacionadas: PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524
• A trombomodulina acelera a ativação da carboxipeptidase B2 plasmática (CPB2), que cliva aminoácidos básicos C-terminais de cininas e anafilatoxinas, contribuindo para a inibição da fibrinólise. Referências relacionadas: PMID:26663133
• Ela suprime a inflamação ao sequestrar a molécula pró-inflamatória HMGB1, impedindo sua interação com RAGE e outros receptores. Referências relacionadas: PMID:15841214
• A proteína altera a especificidade de clivagem do receptor 1 ativado por protease (PAR1), inibindo assim a permeabilidade endotelial e a inflamação (Por similaridade).
• Localização subcelular: predominantemente ligada à membrana.
• Especificidade tecidual: a expressão é exclusiva de células endoteliais.
• Suas características estruturais incluem um domínio semelhante a EGF, pontes dissulfeto, glicosilação e uma modificação de proteoglicano; a proteína madura migra em aproximadamente 60 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este conjugado é destinado à coloração por imunofluorescência direta e detecção por citometria de fluxo de CD141/Trombomodulina humana na superfície de células vivas ou fixadas.
• A concentração ideal do anticorpo deve ser determinada por titulação no sistema experimental relevante; uma faixa inicial de 0,5–5 µg/mL é frequentemente usada para coloração de superfície celular.
• Use controle de isotipo e corante de viabilidade apropriados para discriminar células vivas e minimizar o fundo.
• Na preparação da amostra, evite a digestão excessiva com tripsina, pois a trombomodulina é sensível à tripsina; considere o uso de reagentes de dissociação não enzimáticos.
• CD141 é altamente expresso em células endoteliais vasculares; considere usar culturas primárias de células endoteliais ou células progenitoras endoteliais de sangue periférico como controle positivo.
• Observe que o anticorpo reconhece um epitopo extracelular; a permeabilização não é necessária para a coloração de superfície, mas pode ser usada para pools intracelulares, se necessário, após a fixação.

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