Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD166/ALCAM Humano para Citometria de Fluxo - Q13740

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD166/ALCAM

• O CD166/ALCAM, também conhecido como molécula de adesão celular de leucócitos ativados, é uma molécula de adesão celular que medeia contatos celulares heterotípicos (com CD6) e homotípicos, desempenhando um papel fundamental na ativação de células T e na formação da sinapse imunológica. Referências relacionadas: PMID:15048703, PMID:15496415, PMID:16352806, PMID:24945728, PMID:15294938
• Atua como ligante do receptor inibitório LILRB4, suprimindo a proliferação de células T, e é essencial para o enxerto de células-tronco hematopoiéticas na medula óssea. Referências relacionadas: PMID:29263213, PMID:24740813
• As interações homotípicas do ALCAM facilitam a adesão de células dendríticas às células endoteliais e inibem a migração das células endoteliais, ao mesmo tempo que promovem a formação de tubos. Referências relacionadas: PMID:23169771, PMID:15496415
• Uma isoforma secretada, gerada por splicing alternativo, antagoniza as funções do ALCAM ligado à membrana, inibindo a adesão celular e promovendo a migração das células endoteliais.
• Subcelularmente, o ALCAM está localizado na membrana celular, incluindo as projeções axonais e dendríticas, e pode ser secretado.
• A expressão tecidual é ampla: detectada em células-tronco hematopoiéticas, células T/B ativadas, monócitos, células dendríticas e várias células endoteliais e epiteliais; elevada em linhagens de melanoma metastático. Referências relacionadas: PMID:24740813, PMID:23169771, PMID:15048703, PMID:16352806, PMID:9502422, PMID:7760007, PMID:15496415
• A proteína contém domínios semelhantes às imunoglobulinas, é glicosilada e possui ligações dissulfeto; a isoforma canônica tem um peso molecular previsto de aproximadamente 65 kDa, mas várias bandas podem ser observadas devido ao splicing e à glicosilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 28–526), que inclui a região de ligação ao ligante; isso sugere que o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo acessível em células vivas, sendo adequado para citometria de fluxo.
• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração para o seu tipo celular; inclua controles de isotipo apropriados.
• Como a expressão de ALCAM varia entre os tipos celulares e os estados de ativação, valide a coloração em controles positivos conhecidos (por exemplo, células T ativadas e células dendríticas) e controles negativos.
• As múltiplas bandas proteicas (15–65 kDa) anotadas nas especificações podem refletir variantes de splicing ou produtos de clivagem; se realizar western blot, confirme a especificidade com um lisado de células que superexpressem ALCAM.
• Este anticorpo é validado para reatividade humana; a reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada e deve ser testada, se necessário.

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