Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Humano CD177 () para Citometria de Fluxo - Q8N6Q3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD177

• O CD177 (também designado HNA-2a, NB1 GP, PRV-1) é uma glicoproteína ancorada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) expressa num subconjunto de neutrófilos humanos maduros.
• Associa-se ao heterodímero de integrina beta-2 ITGAM/CD11b–ITGB2/CD18 para mediar a ativação de neutrófilos preparados com TNF, incluindo desgranulação e produção de superóxido (PubMed:21193407).
  Referências relacionadas: PMID:21193407
• O CD177 atua como um recetor de superfície celular para a proteinase 3 madura (PRTN3), permitindo a exibição de PRTN3 em neutrófilos. Esta interação pode melhorar a integridade das junções endoteliais durante a diapedese de neutrófilos (PubMed:17244676, PubMed:18462208, PubMed:23202369).
  Referências relacionadas: PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:23202369
• A proteína promove a adesão de neutrófilos em detrimento da migração, atenuando a sinalização de quimiocinas e impedindo a internalização da integrina beta-2 (PubMed:28807980).
  Referências relacionadas: PMID:28807980
• A ligação heterófila à PECAM1 nas células endoteliais facilita a migração transendotelial de neutrófilos in vitro, embora o CD177 pareça dispensável para o recrutamento de neutrófilos durante a infeção bacteriana in vivo (PubMed:17580308, PubMed:23461681).
  Referências relacionadas: PMID:17580308 PMID:23461681
• O CD177 é altamente expresso na medula óssea normal e está regulado positivamente nos granulócitos de doentes com policitemia vera (PV) e trombocitemia essencial (ET), servindo como marcador de doença (PubMed:10753836, PubMed:12377969).
  Referências relacionadas: PMID:10753836 PMID:12377969
• A expressão começa na fase de metamielócito durante a diferenciação de neutrófilos e a percentagem de neutrófilos positivos para CD177 varia amplamente entre indivíduos saudáveis (PubMed:17244676, PubMed:18462208, PubMed:24926686, PubMed:27227454).
  Referências relacionadas: PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:24926686 PMID:27227454
• A nível subcelular, o CD177 localiza-se na membrana plasmática, rafts da membrana, vesículas secretoras, membranas de grânulos citoplasmáticos e lamelipódios, consistente com funções no tráfego e secreção.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O conjugado é adequado para a deteção direta por citometria de fluxo do CD177 em populações de neutrófilos humanos. Considere o uso de controlos de isotipo apropriados e bloqueio de recetores Fc para minimizar a ligação não específica.
• O imunogénio compreende o domínio extracelular (aminoácidos 22–407), sugerindo que o anticorpo reconhece o CD177 nativo em células vivas sem permeabilização.
• Como o CD177 é expresso apenas por um subconjunto de neutrófilos, inclua marcadores de superfície (por exemplo, CD16, CD66b) para fazer o gating correto dos neutrófilos e avaliar a fração positiva para CD177.
• Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu ensaio específico de citometria de fluxo e tipo de amostra.

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