Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD22 humano para citometria de fluxo - P20273

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD22

• O CD22, também conhecido como Siglec-2 ou molécula de adesão celular de linfócitos B (BL-CAM), é uma glicoproteína transmembrana pertencente à família das lectinas semelhantes a imunoglobulinas ligantes de ácido siálico (Siglec). É altamente expresso nas células B e atua como um correceptor inibitório que modula a sinalização do receptor de células B (BCR). Referências relacionadas: PMID:34330755, PMID:8627166
• Após a ativação do BCR, os motivos inibitórios baseados em tirosina do imunorreceptor (ITIMs) do CD22 são fosforilados pela quinase Src LYN, que recruta a proteína tirosina-fosfatase PTPN6 (SHP-1). Isso leva à atenuação da mobilização de cálcio e da ativação celular, regulando negativamente as respostas das células B e podendo induzir apoptose sob sinalização intensa. Referências relacionadas: PMID:8627166, PMID:20516366
• O CD22 liga-se especificamente a resíduos de ácido siálico ligados em α2,6 em glicoproteínas como CD45, IgM e o próprio CD22 em uma configuração cis, e também pode atuar como molécula de adesão por meio de interações trans com ligantes presentes em outras células. Referências relacionadas: PMID:20172905
• A proteína desempenha funções essenciais na diferenciação das células B, na apresentação de antígenos e no tráfego para a medula óssea, com sua expressão predominantemente restrita aos linfócitos B maduros. Referências relacionadas: PMID:34330755, PMID:8627166
• O CD22 está sujeito a splicing alternativo, produzindo variantes com diferentes números de domínios extracelulares semelhantes a Ig; ele também é intensamente glicosilado e fosforilado, características que contribuem para sua função e regulação.
• O CD22 humano de comprimento total é composto por 847 aminoácidos, com uma massa molecular calculada de aproximadamente 95,3 kDa, e contém um peptídeo-sinal N-terminal, sete domínios do tipo C2 semelhantes a Ig, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática com motivos ITIM e semelhantes a ITIM.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado (proteína recombinante abrangendo os aminoácidos 20–687) cobre toda a região extracelular do CD22 humano, incluindo todos os domínios semelhantes a Ig, o que ajuda a garantir o reconhecimento da proteína nativa em células vivas.
• Como anticorpo pré-conjugado (), este reagente está pronto para citometria de fluxo direta, sem uma etapa de coloração secundária; ainda assim, titule o anticorpo em linhagens celulares positivas e negativas relevantes para determinar a concentração de trabalho ideal.
• Linhagens comuns de células B humanas (por exemplo, Raji, Daudi e Ramos) expressam níveis elevados de CD22 e podem servir como controles positivos; recomenda-se um anticorpo de controle isotípico para avaliar a ligação de fundo.
• Para painéis de citometria de fluxo multicolorida, inclua controles de compensação de fluorescência e considere que a expressão de CD22 pode ser modulada pelo estado de ativação das células B.

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