Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD228/MFI2 para Citometria de Fluxo - P08582

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD228/MFI2

• Codificada pelo gene MELTF (também conhecido como MAP97, MFI2), a melanotransferrina é uma glicoproteína de superfície celular da família das transferrinas. O splicing alternativo produz isoformas, com a proteína de comprimento total de ~80 kDa e uma isoforma secretada de ~32 kDa.
• Atua na captação celular de ferro: liga um íon férrico por subunidade, se internaliza e recicla de volta para a membrana plasmática; também pode transportar zinco.
• Identificada originalmente como o antígeno p97 associado ao melanoma, é predominantemente expressa em melanomas humanos, certos tecidos fetais, fígado, epitélio, cordão umbilical, placenta e ductos das glândulas sudoríparas.
• Ancorada à membrana celular por meio de uma porção GPI C-terminal, atuando como um transportador ancorado a lipídios, não como carreador solúvel.
• Modificações pós-traducionais incluem pontes dissulfeto, glicosilação e fosforilação, conforme identificado por proteômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 20-708, englobando quase todo o domínio extracelular de comprimento total; verifique a reatividade com CD228 nativo e recombinante no seu painel de citometria de fluxo.
• Como anticorpo diretamente conjugado, não há necessidade de reagente secundário; faça a titulação entre 0,1–1 µg por milhão de células para determinar o índice de coloração ideal.
• Valide a especificidade usando células com CD228 silenciado ou uma linha celular negativa conhecida; acompanhe a viabilidade celular e exclua os dupletos para evitar artefatos causados por células mortas com alta autofluorescência.
• Proteínas ancoradas por GPI podem ser sensíveis à tripsina; prepare suspensões de células únicas com dissociação enzimática ou mecânica suave ao trabalhar com linhas de células aderentes.

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