Anticorpo monoclonal de coelho anti-humano CD261/TRAIL-R1 para citometria de fluxo - O00220

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de CD261/TRAIL-R1

• CD261, também conhecido como TRAIL-R1, DR4 ou TNFRSF10A, é um receptor de morte pertencente à superfamília de receptores do fator de necrose tumoral que se liga especificamente ao ligante citotóxico TNFSF10/TRAIL para induzir apoptose (PubMed:26457518, PubMed:38532423). Referências relacionadas: PMID:26457518, PMID:38532423
• Após a ligação de TRAIL, o receptor oligomeriza-se e recruta a proteína adaptadora FADD, que então recruta a procaspase-8 para formar o complexo de sinalização indutor de morte (DISC). Isso desencadeia a ativação autoproteolítica da caspase-8 e inicia a cascata de caspases que conduz à apoptose (PubMed:19090789). Referências relacionadas: PMID:19090789
• Além da apoptose, a sinalização de TRAIL-R1 pode promover a ativação da via NF-kappa-B, contribuindo para a regulação transcricional de genes associados à imunidade, à sobrevivência e à inflamação (PubMed:9430227). Referências relacionadas: PMID:9430227
• A expressão é ampla, com níveis mais elevados observados no baço, nos leucócitos do sangue periférico, no intestino delgado, no timo e em determinadas linhagens celulares tumorais, incluindo K-562 e MCF-7; também é expresso em células T ativadas.
• Subcelularmente, o TRAIL-R1 encontra-se predominantemente na membrana celular e em jangadas de membrana, embora também possa localizar-se no citoplasma e no citosol.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, formação de pontes dissulfeto e fosforilação, características de sua função como receptor transmembranar de sinalização.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Este anticorpo é conjugado com , tornando-o adequado para citometria de fluxo direta, sem a necessidade de reagentes de detecção secundários.
• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 124-232), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece o receptor nativo na superfície celular; valide a reatividade em linhagens celulares apropriadas que expressem CD261.
• Otimize as concentrações de coloração por titulação utilizando células de controle positivo e negativo conhecidas (por exemplo, K-562 ou MCF-7 como controle positivo e células negativas para o receptor como controle negativo).
• Para a detecção intracelular, considere o uso de métodos apropriados de permeabilização, embora a aplicação principal seja a coloração da superfície celular.
• Evite a exposição prolongada à luz para manter a estabilidade do fluoróforo e minimizar o fotobranqueamento.

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