Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD261/TRAIL-R1 para Citometria de Fluxo - O00220

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD261/TRAIL-R1

• TNFRSF10A, também conhecido como Receptor de morte 4 (DR4) ou TRAIL-R1, é um membro da superfamília dos receptores de fator de necrose tumoral. Funciona como receptor para o ligante citotóxico TNFSF10/TRAIL. Referências relacionadas: PMID:26457518, PMID:38532423
• Após a ligação de TRAIL, o receptor recruta a molécula adaptadora FADD e a caspase-8 para formar o complexo de sinalização indutor de morte (DISC), que ativa proteoliticamente a caspase-8 e inicia a cascata de caspases apoptótica. Referências relacionadas: PMID:19090789
• TRAIL-R1 também promove a ativação de NF-kappa-B, ligando-o a vias de sinalização inflamatórias e de sobrevivência. Referências relacionadas: PMID:9430227
• A proteína se localiza principalmente na membrana celular e nas membranas de lipid rafts, mas também foi detectada no citoplasma e no citosol.
• É amplamente expressa, com altos níveis no baço, leucócitos do sangue periférico, intestino delgado e timo, bem como em certas linhas de células cancerosas, como K-562 e MCF-7.
• As modificações pós-traducionais incluem formação de pontes dissulfeto, glicosilação, metilação e fosforilação, que podem regular sua função e estabilidade.
• Como proteína transmembrana de tipo I, contém um peptídeo sinal, repetições extracelulares ricas em cisteína, uma hélice transmembrana e um domínio de morte citoplasmático.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 124–232), o que indica que o anticorpo tem como alvo um epítopo acessível na superfície celular, que é ideal para detecção por citometria de fluxo de células vivas não permeabilizadas.
• Como conjugado fluorescente, recomenda-se uma titulação cuidadosa para obter a melhor relação sinal-ruído; as concentrações iniciais típicas para citometria de fluxo podem estar na faixa de 0,1–1 µg por ensaio, mas isso deve ser validado experimentalmente.
• Garanta controles adequados, incluindo controles de isotipo e células não coradas, para estabelecer gating e avaliar a coloração de fundo específica para suas linhas de células e condições de tratamento.
• Para uma análise abrangente da apoptose induzida por TRAIL, considere a coloração conjunta com marcadores de apoptose (por exemplo, Anexina V, caspase-3 clivada) ou outros receptores de morte (por exemplo, TRAIL-R2/DR5).

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