Anticorpo monoclonal de coelho anti-humano CD263/TRAIL-R3 - O14798

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de CD263/TRAIL-R3

• CD263/TRAIL-R3, codificado pelo gene TNFRSF10C, é um membro da superfamília de receptores do fator de necrose tumoral que não possui um domínio de morte intracelular, sendo classificado como um receptor chamariz para o ligante citotóxico TRAIL (ligante indutor de apoptose relacionado ao TNF).
• A proteína funciona exclusivamente como um receptor que se liga ao TRAIL, mas, ao contrário dos receptores funcionais de TRAIL TNFRSF10A e TNFRSF10B, não pode transduzir um sinal apoptótico devido à ausência do domínio de morte.
• Ao competir com os receptores pró-apoptóticos de TRAIL pela ligação ao ligante, CD263/TRAIL-R3 protege as células da apoptose induzida por TRAIL, contribuindo para a regulação das vias de morte celular.
• Também conhecido como DcR1, LIT, TRAILR3 ou TRID, este receptor está ligado à membrana celular por meio de uma âncora de glicosilfosfatidilinositol (GPI), conforme evidenciado por suas palavras-chave e características estruturais.
• É uma glicoproteína com ligações dissulfeto e um peptídeo-sinal, consistente com sua localização na membrana e seu papel como receptor da superfície celular.
• CD263/TRAIL-R3 é expresso em níveis mais elevados em tecidos normais, como linfócitos do sangue periférico, baço, músculo esquelético, placenta, pulmão e coração, em comparação com linhagens celulares tumorais, sugerindo um papel na proteção das células normais contra a citotoxicidade mediada por TRAIL.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 26-235) de CD263/TRAIL-R3 humano, que inclui a região de ligação ao TRAIL; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça o sítio de ligação ao ligante caso o epítopo seja conformacional.
• Considerando a natureza ancorada em GPI de CD263/TRAIL-R3, a detecção da superfície celular por citometria de fluxo (CF) pode ser ideal. Considere utilizar células viáveis e não permeabilizadas para preservar a integridade da membrana e a conformação do receptor.
• Como receptor chamariz, CD263/TRAIL-R3 não possui uma cauda citoplasmática; assim, o conjugado permite a detecção direta sem reagentes secundários, simplificando o fluxo de trabalho de CF.
• Recomenda-se a titulação do anticorpo para cada tipo celular, a fim de determinar a concentração ideal de marcação e minimizar o background.
• Para verificar a especificidade, inclua controles apropriados: anticorpos de controle isotípico e linhagens celulares com níveis conhecidos de expressão de CD263/TRAIL-R3, como linfócitos do sangue periférico (que expressam a proteína) em comparação com linhagens celulares tumorais (que frequentemente apresentam expressão reduzida).

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