Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano CD28 Conjugado a para Citometria de Fluxo - P10747

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD28

• O CD28 é uma glicoproteína de superfície específica de células T que funciona como um receptor coestimulatório essencial para a ativação, proliferação, sobrevivência das células T e manutenção da homeostase imunológica. Referências relacionadas: PMID:1650475 PMID:7568038
• Ao se ligar aos seus ligantes cognatos CD80 ou CD86, o CD28 amplifica os sinais do TCR e fornece sinais intracelulares únicos que reprogramam a expressão gênica das células T, levando ao aumento da proliferação e produção de citocinas, particularmente IL-2, tanto em subpopulações de células T CD4+ quanto CD8+. Referências relacionadas: PMID:12196291 PMID:24665965 PMID:35397202
• A ligação do ligante desencadeia o recrutamento da proteína quinase C-teta (PRKCQ) e GRB2, ativando o NF-kappa-B por meio de vias dependentes e independentes de PI3K/Akt; em conjunto com a coestimulação de TCR/CD3 e CD40L, isso aumenta a produção de IL-4 e IL-10. Referências relacionadas: PMID:21964608 PMID:24665965 PMID:7568038 PMID:8617933
• O CD28 também potencializa a ativação mediada por CD40L do NF-kappa-B e das quinases MAPK8 e PAK2 em células T. Referências relacionadas: PMID:15067037
• Expresso na superfície celular de células T e plasmócitos, o CD28 pertence à superfamília das imunoglobulinas e contém um único domínio do tipo V semelhante a Ig, uma região transmembrana e uma cauda citoplasmática que sofre fosforilação após ativação.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e fosforilação em resíduos de tirosina, que são críticas para a transdução de sinal.
• A proteína madura tem um peso molecular calculado de aproximadamente 25 kDa (25066 Da), consistente com sua detecção em aplicações de Western blotting e citometria de fluxo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi gerado contra a proteína recombinante de comprimento total do CD28 humano (P10747). Seu desempenho foi validado em citometria de fluxo (CF); para outras aplicações, os usuários devem realizar otimização individual.
• Para CF, faça titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração no sistema de amostra relevante, e inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio de Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Como o CD28 é rapidamente internalizado após ativação, considere realizar a coloração de superfície a 4°C ou usar um inibidor metabólico para prevenir a internalização induzida por ligante se estiver estudando células T ativadas.
• Confirme a especificidade do alvo pré-incubando o anticorpo com excesso de proteína recombinante de CD28 para bloquear a coloração específica.

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