Anticorpo Monoclonal ABflo 488 de Coelho anti-Humano CD301/CLEC10A para FC - Q8IUN9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD301/CLEC10A

• CD301/CLEC10A funciona como um receptor de lectina do tipo C que reconhece especificamente glicanos terminados em N-acetilgalactosamina (GalNAc) em glicoproteínas e glicolipídios de maneira dependente de Ca²⁺, incluindo os epítopos do antígeno Tn, antígeno T e LacdiNAc. Referências relacionadas:
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:17616966 | PMID:23507963

• Ele atua como um receptor de sinalização na interface das interações entre APC e células T, reduzindo a atividade da fosfatase CD45 em células T efetoras e promovendo a tolerância de células dendríticas, o que leva à geração de células T CD4⁺ reguladoras imunossupressoras. Referências relacionadas:
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:22213806

• Como um receptor de reconhecimento de padrões endocítico, CD301/CLEC10A internaliza mucinas tumorais que carregam o antígeno Tn e as entrega aos compartimentos endolisossomais para apresentação de antígenos de MHC de classe I e II, contribuindo para a imunidade antitumoral. Referências relacionadas:
  PMID:15802303 | PMID:17616966 | PMID:17804752

• CD301/CLEC10A se localiza na membrana celular, membrana do endossomo inicial e membrana do lisossomo, consistente com seus papéis na ligação do ligante, internalização e processamento de antígenos.

• A proteína é expressa predominantemente em células apresentadoras de antígenos mieloides, incluindo células dendríticas dérmicas em linfonodos e pele.

• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas de CD301/CLEC10A, contribuindo para a diversidade funcional; a isoforma canônica tem uma massa molecular prevista de ~35 kDa, com bandas adicionais observadas em 28 kDa e 32 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 61–316) abrange uma grande parte do domínio extracelular, incluindo o domínio de reconhecimento de carboidratos (CRD). Este design provavelmente gera anticorpos que reconhecem o CD301/CLEC10A nativo em citometria de fluxo.

• A conjugação com ABflo 488 fornece um marcador fluorescente direto para coloração em etapa única; sempre inclua controles de isotipo apropriados e controles de fluorescência menos um (FMO) para confirmar a especificidade.

• Para FC, otimize as titulações do anticorpo usando uma linha celular relevante ou células dendríticas mieloides primárias; uma faixa de concentração inicial típica é de 0,5–5 µg por milhão de células, mas isso deve ser determinado empiricamente.

• Como CD301/CLEC10A é expresso em DCs mieloides e macrófagos, considere usar PBMCs ou células dendríticas derivadas de monócitos para validação; verifique a expressão por co-coloração com marcadores de linhagem (por exemplo, CD14, CD1c).

• O anticorpo também pode ser adequado para detectar células dendríticas infiltrantes de tumor em amostras de tumor dissociadas; valide os protocolos de fixação e permeabilização se a coloração intracelular for necessária.

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