Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD301/CLEC10A para FC - Q8IUN9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CLEC10A

• O CLEC10A é um recetor de lectina tipo C transmembranar tipo II com isoformas de splicing alternativo, também conhecido como CD301, lectina tipo galactose de macrófagos (MGL), HML e recetor de asialoglicoproteína de DC, expresso predominantemente em células apresentadoras de antigénio mieloides.
• Liga-se especificamente a resíduos terminais de N-acetilgalactosamina (GalNAc) presentes em glicoproteínas e glicolípidos, incluindo antigénio Tn, LacdiNAc e gangliósidos GM2/GD2, de forma dependente de Ca2+. Referências relacionadas: PMID:15802303, PMID:23507963
• Em células dendríticas imaturas, o CLEC10A interage com o CD45 modificado com antigénio Tn em células T, diminuindo a sua atividade fosfatase para modular a ativação, proliferação e produção de citocinas das células T, promovendo a maturação de células dendríticas tolerogénicas e a indução de células T reguladoras. Referências relacionadas: PMID:15802303, PMID:16998493, PMID:22213806
• Como recetor endocítico, o CLEC10A internaliza antigénios tumorais portadores de antigénio Tn para apresentação por MHC de classe I e II, ligando o reconhecimento inato às respostas imunes antitumorais adaptativas. Referências relacionadas: PMID:15802303, PMID:17616966, PMID:17804752
• A nível subcelular, o CLEC10A localiza-se na membrana plasmática e, após ligação do ligando, trafega para membranas de endossomas precoces e lisossomas para processamento de antigénio.
• A nível proteico, o CLEC10A é expresso em células apresentadoras de antigénio mieloides nos gânglios linfáticos e na pele, especificamente em células dendríticas dérmicas.
• A proteína contém um domínio de hélice superenrolada (coiled-coil), um domínio de lectina tipo C, uma hélice transmembranar e potenciais locais de N-glicosilação; a sua atividade é regulada por Ca2+ e formação de pontes dissulfeto.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde ao domínio extracelular (aa 61-316) incluindo o domínio de reconhecimento de hidratos de carbono (CRD), indicando que o anticorpo provavelmente visa a região de ligação do ligando; considere verificar a integridade do epítopo estrutural em condições nativas versus desnaturantes.
• Para citometria de fluxo, este conjugado fluorescente pode ser usado para detetar CLEC10A na superfície celular em células mieloides humanas; titule o anticorpo e inclua controlos de isótipo apropriados para garantir a especificidade.
• A reatividade cruzada com CLEC10A humano foi relatada; valide a reatividade no seu sistema de amostras específico, especialmente considerando potenciais variações de isoformas.
• Use tampão gelado e evite a permeabilização, a menos que visa compartimentos intracelulares, pois o recetor é ligado à membrana; inclua etapas de bloqueio do recetor Fc para análise de células mieloides.
• Considere a coloração simultânea com marcadores de células dendríticas (por exemplo, CD11c, CD1c) para confirmar a expressão em subconjuntos de células dendríticas; note que o estado de ativação pode alterar os níveis de expressão do CLEC10A.

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