Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD326/EPCAM para FC - P16422

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Molécula de Adesão de Células Epiteliais

• A molécula de adesão de células epiteliais (EPCAM), também designada CD326, é uma glicoproteína transmembrana do tipo I e membro da família de transdutores de sinal de cálcio associados a tumores.
• Medeia a adesão celular homofílica entre células epiteliais intestinais (IECs) e linfócitos intraepiteliais (IELs) no epitélio mucoso, fornecendo uma barreira imunológica contra a infecção mucosa.
• O EPCAM desempenha um papel na proliferação e diferenciação de células-tronco embrionárias, regulando positivamente a expressão de FABP5, MYC e ciclinas A e E.
• A proteína localiza-se na membrana celular lateral e nas junções de oclusão, consistente com a sua função adesiva.
• É altamente expresso em células-tronco embrionárias indiferenciadas, com níveis a diminuir rapidamente após a diferenciação; também está presente em quase todas as membranas de células epiteliais, mas ausente das membranas de células mesodérmicas e neurais.
• O EPCAM é frequentemente superexpresso na superfície de adenocarcinomas, classificando-o como um antígeno tumoral e um alvo para diagnósticos e terapêuticas oncológicas.
• As modificações pós-traducionais incluem a formação de ligações dissulfeto e glicosilação, e a proteína contém um peptídeo sinal e uma hélice transmembrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aminoácidos 24–265), sugerindo que o anticorpo visa um epítopo acessível na superfície celular, adequado para citometria de fluxo sem permeabilização.
• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu sistema experimental e inclua controles de isótipo apropriados para avaliar a ligação inespecífica.
• Use centrifugação de baixa velocidade e ressuspensão suave para manter a viabilidade celular, uma vez que o EPCAM é um antígeno de superfície; evite digestão enzimática severa que pode clivar epítopos extracelulares.
• Devido à conjugação com fluoróforo, proteja as amostras da luz e analise prontamente para minimizar o fotobranqueamento.
• Valide a reatividade em linhagens celulares de origem epitelial conhecidas por expressar EPCAM, como MCF-7 (adenocarcinoma de mama) ou HT-29 (adenocarcinoma colorretal), observando que os níveis de expressão podem diferir com o estado de diferenciação.
• Uma vez que o EPCAM é um antígeno tumoral, considere estratégias de "gating" para distinguir células epiteliais de populações não epiteliais em amostras mistas.

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