Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD33 humano conjugado com para FC - P20138

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD33

• O CD33, também conhecido como Siglec-3 (lectina semelhante à imunoglobulina 3 ligadora de ácido siálico) ou p67, é um receptor transmembrana pertencente à superfamília das imunoglobulinas e à família Siglec de lectinas ligadoras de ácido siálico. É expresso principalmente em células da linhagem mieloide.
• O CD33 liga-se preferencialmente a glicanos que contêm ácido siálico ligado em alfa-2,3 e alfa-2,6, mediando interações célula-célula e mantendo as células imunes em um estado de repouso. O engajamento do ligante desencadeia a fosforilação de seus motivos inibitórios de tirosina baseados em imunorreceptor (ITIMs) citoplasmáticos por quinases semelhantes a Src, como a LCK, criando sítios de ancoragem para as proteína-tirosina fosfatases SHP-1 e SHP-2. Essas fosfatases então desfosforilam moléculas de sinalização a jusante para suprimir a ativação celular. Referências relacionadas: PMID:7718872, PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798, PMID:10611343, PMID:11320212
• A função inibitória do CD33 na ativação de monócitos requer a atividade da fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K). Referências relacionadas: PMID:15597323
• O CD33 está localizado na membrana celular e nos peroxissomos, conforme indicado por estudos de fracionamento subcelular e imunofluorescência.
• A proteína é expressa predominantemente em células da linhagem monocítica/mieloide; no cérebro, é expressa principalmente em células da micróglia, onde tem sido implicada em doenças neurodegenerativas.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, formação de ligações dissulfeto e fosforilação de resíduos de tirosina dos ITIMs. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para este anticorpo corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 18-259) do CD33 humano. Esta região está exposta na superfície celular, tornando-a adequada para citometria de fluxo em células vivas sem permeabilização.
• O é um corante fluorescente verde com máximos de excitação/emissão de aproximadamente 491/516 nm, compatível com o canal FITC na maioria dos citômetros de fluxo. Garanta a compensação adequada se for usado em painéis multicolor.
• Para uma coloração ideal, faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho para o seu sistema experimental específico. Inclua controles isotípicos apropriados e controles de fluorescência menos um (FMO) para definir os limiares de gateamento.
• Como os níveis de expressão do CD33 podem variar com o tipo de célula e estado de ativação, valide o anticorpo na sua matriz de amostra (por exemplo, células mononucleares do sangue periférico, medula óssea ou linhagens celulares).

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