Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD335/NKp46 para IF/ICC e FC - O76036

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor 1 de Disparo da Citotoxicidade Natural (CD335/NKp46)

• A proteína é um receptor de disparo da citotoxicidade natural (NCR1), também conhecido como CD335, LY94 ou NKp46. Pertence à superfamília das imunoglobulinas e existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• Funciona como um receptor ativador de citotoxicidade que aumenta a capacidade das células natural killer (NK) ativadas de lisar células tumorais.
• O CD335/NKp46 é seletivamente expresso em células NK em repouso e ativadas, servindo como um marcador específico para a identificação de células NK.
• O receptor é uma glicoproteína transmembrana do tipo I localizada na membrana celular, com uma região extracelular contendo dois domínios semelhantes à imunoglobulina.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e formação de ligações dissulfeto, contribuindo para a sua estabilidade estrutural.
• O gene NCR1 localiza-se no cromossoma 19 humano e codifica uma proteína com um peso molecular previsto de aproximadamente 34,5 kDa, embora as bandas observadas possam variar devido à glicosilação (faixa de 21-34 kDa).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio compreende o domínio extracelular (aa 22-254) do CD335/NKp46 humano, que está exposto na superfície celular; este design é adequado para detetar o receptor nativo.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), considere o uso de preparações celulares fixadas com acetona ou paraformaldeído e inclua um controlo negativo sem o anticorpo primário para avaliar o fundo.
• Para citometria de fluxo (FC), a conjugação direta com elimina a necessidade de um anticorpo secundário; certifique-se de que o fluoróforo é compatível com as configurações de laser e filtro do seu instrumento (excitação/emissão semelhantes ao Alexa Fluor 594).
• Células expressas ou linhagens de células NK devem ser usadas como controlos positivos; PBMCs humanos recém-isolados podem servir como fonte de células NK endógenas expressando CD335/NKp46.
• Devido à heterogeneidade da glicosilação, múltiplas bandas podem aparecer em western blotting; se for tentada a análise de WB, note que o epítopo pode ser desnaturado por condições redutoras e de fervura.

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