Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD337/NKp30 para IF/ICC e FC (intra) - O14931

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD337/NKp30

• A proteína recetor 3 de desencadeamento da citotoxicidade natural (NCR3), também conhecida como NKp30 ou CD337, é um recetor nas células NK que pertence à superfamília das imunoglobulinas. Existe como múltiplos isoformas devido a splicing alternativo, resultando em pesos proteicos que variam entre ~16 e 21 kDa (observado) com um peso molecular teórico de ~21,6 kDa.
• O NCR3 atua como um recetor ativador nas células natural killer (NK), estimulando a citotoxicidade após ligação a ligandos extracelulares como BAG6 e NCR3LG1.
• O envolvimento do NCR3 pelo BAG6 promove a maturação de células dendríticas mieloides (DC), tanto através da morte de DCs imaturas como pela indução de células NK a libertarem TNF-α e IFN-γ, que por sua vez impulsionam a maturação das DCs.
• O recetor é seletivamente expresso por todas as células NK em repouso e ativadas, com expressão fraca também detetada no baço.
• A nível subcelular, o NCR3 localiza-se na membrana celular, consistente com o seu papel de recetor transmembranar.
• A proteína apresenta um domínio de imunoglobulina, um péptido sinal, uma hélice transmembranar e ligações dissulfeto; é também glicosilada. As palavras-chave do UniProt incluem splicing alternativo, glicoproteína e imunidade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado que o imunogénio corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 19-135), o anticorpo pode detetar NCR3 expresso na superfície sem permeabilização. Para citometria de fluxo intracelular, é necessária permeabilização; otimize os protocolos de fixação e permeabilização para linhagens de células NK.
• A gama de pesos proteicos observados (16–21 kDa) sugere múltiplos isoformas ou modificações pós-traducionais; valide a especificidade no seu sistema celular usando controlos apropriados.
• Uma vez que o NCR3 é seletivamente expresso em células NK, inclua tipos de células de controlo (por exemplo, células T) para confirmar a especificidade em experiências de IF/ICC.
• Para IF/ICC, teste uma gama de diluições do anticorpo em células fixadas com paraformaldeído; a recuperação de antigénio pode melhorar o sinal se houver suspeita de mascaramiento do epítopo.

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