Anticorpo Monoclonal Coelho anti-CD34 Humano para FC - P28906

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD34

• O CD34, também conhecido como antígeno de célula progenitora hematopoiética CD34, é uma proteína de membrana tipo I de passagem única que pertence à família CD34. Ele sofre splicing alternativo, originando isoformas com pesos moleculares aparentes de aproximadamente 35 kDa e 41 kDa.
• Funciona como uma molécula de adesão celular, desempenhando um papel crítico na hematopoiese inicial ao mediar a ligação de células-tronco/progenitoras hematopoiéticas à matriz extracelular e às células estromais da medula óssea.
• O CD34 pode atuar como um andaime que apresenta glicanos específicos de linhagem, permitindo que as células-tronco se liguem a lectinas expressas por células estromais ou outros componentes da medula, regulando assim a localização e retenção celular.
• Ele apresenta ligantes de carboidratos para as selectinas, o que apoia ainda mais a adesão e o tráfego celular dentro do nicho hematopoiético.
• A proteína é seletivamente expressa na superfície de células progenitoras hematopoiéticas e no endotélio de pequenos vasos de vários tecidos, tornando-a um marcador chave para o isolamento de células-tronco e estudos de biologia vascular.
• A localização subcelular é principalmente na membrana plasmática, consistente com seu papel nas interações célula-célula e célula-matriz.
• Modificações pós-traducionais incluem extensa glicosilação N- e O-ligada, fosforilação e a presença de um peptídeo sinal e um domínio transmembrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é projetado para citometria de fluxo (FC) e está diretamente conjugado ao , um fluoróforo excitável por laser violeta; nenhum reagente de detecção secundário é necessário, reduzindo etapas experimentais e fundo.
• O imunogênio abrange os aminoácidos 170–290 do CD34 humano (dentro da região extracelular), sugerindo que o anticorpo reconhece um epítopo extracelular em células vivas; considere o manuseio suave das células para preservar a integridade do antígeno de superfície.
• Para aplicações de FC, faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para seu tipo celular e condições de marcação, e inclua controles isotípicos apropriados e controles de fluorescência menos um (FMO).
• Valide o desempenho com células humanas CD34-positivas conhecidas (por exemplo, linhagens celulares KG‑1a ou MOLM‑13) ou células progenitoras hematopoiéticas primárias, e considere a co-marcação com outros marcadores de células-tronco para avaliar subpopulações progenitoras.
• Os pesos moleculares previstos de 35 kDa e 41 kDa podem corresponder a isoformas diferentemente glicosiladas; esta informação pode ser usada para confirmar a especificidade em western blot se o anticorpo for validado para essa aplicação, mas a recomendação principal permanece a FC.

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