Anticorpo Monoclonal Coelho anti-CD34 Humano para IF/ICC e Citometria de Fluxo - P28906

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD34

• O antígeno de células progenitoras hematopoiéticas CD34, codificado pelo gene CD34, é um marcador bem estabelecido para células-tronco e progenitoras hematopoiéticas e também marca endotélios de pequenos vasos.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; a isoforma canônica tem um peso molecular calculado de aproximadamente 41 kDa (UniProt: 40716 Da), enquanto uma variante mais curta de 35 kDa pode surgir de processamento pós-traducional ou diferenças de isoforma.
• O CD34 é uma glicoproteína transmembranar tipo I de passagem única que provavelmente funciona como uma molécula de adesão, mediando a fixação de células-tronco à matriz extracelular da medula óssea ou a células estromais durante a hematopoiese inicial.
• Pode servir como um andaime para glicanos específicos de linhagem, apresentando ligantes de carboidratos para selectinas e facilitando interações célula-célula.
• A localização subcelular é principalmente na membrana celular, consistente com seu papel na adesão e sinalização extracelular.
• A proteína está sujeita a extensas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação ligada a N e O (glicoproteína) e fosforilação, que podem regular sua função e propriedades de ligação.
• A expressão é altamente seletiva: o CD34 é encontrado em células progenitoras hematopoiéticas na medula óssea e sangue periférico, bem como no endotélio de pequenos vasos em muitos tecidos.
• A região extracelular (incluindo os aminoácidos 170–290 usados como imunógeno) contém múltiplos locais de glicosilação e é exposta na superfície celular, tornando-a um alvo acessível para detecção baseada em anticorpos.

Orientacão Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região extracelular (aa 170–290) do CD34 humano, garantindo o reconhecimento do antígeno de superfície nativo; este anticorpo é validado para aplicações de IF/ICC e citometria de fluxo.
• Para coloração por imunofluorescência, fixe e permeabilize as células adequadamente; considere o uso de um protocolo não permeabilizante para detectar o CD34 de superfície, se desejado.
• Na citometria de fluxo, inclua controles de isotipo adequados e etapas de bloqueio do receptor Fc para minimizar a ligação inespecífica; titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu sistema celular.
• A expressão de CD34 é limitada a tipos celulares específicos; use controles positivos bem caracterizados (por exemplo, células KG-1a, HUVECs ou progenitores hematopoiéticos CD34+) e controles negativos (por exemplo, linfócitos, células sanguíneas maduras) para confirmar a especificidade.
• Embora este conjugado seja projetado para IF/ICC e FC, se explorar outras aplicações (por exemplo, IHC, WB), valide o anticorpo nessas condições e considere possíveis diferenças na conformação do antígeno.

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