Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano CD61 para Citometria de Fluxo - P05106

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Integrina beta-3 (CD61)

• A integrina beta-3 (CD61, GPIIIa) é codificada pelo gene ITGB3 e expressa como uma glicoproteína transmembranar do tipo I. O splicing alternativo produz a isoforma beta-3A (amplamente expressa, incluindo em plaquetas e osteoblastos) e a isoforma beta-3C (específica da próstata e testículo).
• Ela forma dois heterodímeros principais: o αIIbβ3 (ITGA2B:ITGB3) específico de plaquetas, que medeia a agregação plaquetária ao se ligar ao fibrinogênio após ativação, e o αVβ3 (ITGAV:ITGB3) amplamente expresso, que atua como receptor para vitronectina, fibronectina, osteopontina e outras proteínas da matriz extracelular.
  Referências relacionadas: PMID:9111081
• A integrina αVβ3 transmite sinais de fatores de crescimento (FGF1, FGF2, IGF1, IGF2, IL1B) e proteínas da matriz, regulando angiogênese, migração celular e sobrevivência.
  Referências relacionadas: PMID:18441324, PMID:28302677, PMID:19578119, PMID:28873464, PMID:29030430
• No sistema nervoso central, a integrina beta-3 modula a força sináptica regulando a localização do transportador de serotonina e a endocitose de receptores AMPA (Por similaridade).
• ITGAV:ITGB3 funciona como um receptor de entrada para vários vírus, incluindo herpesvírus humano 8, coxsackievírus A9, vírus Hantaan, citomegalovírus, metapneumovírus humano, parechovírus humano 1 e vírus do Nilo Ocidental; a proteína Tat do HIV-1 também interage com αVβ3 para promover angiogênese no sarcoma de Kaposi.
• Subcelularmente, a integrina beta-3 localiza-se na membrana celular, membrana do lamellipodium, adesões focais e membranas pós-sinápticas, refletindo seus papéis na adesão, migração e organização sináptica.
• Modificações pós-traducionais incluem ligações dissulfeto, múltiplos sítios de N-glicosilação e fosforilação; liga-se a íons de cálcio e magnésio essenciais para a atividade de ligação ao ligante.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado contra uma proteína recombinante abrangendo os aminoácidos 21–718 do CD61 humano, o que engloba todo o domínio extracelular. Espera-se que reconheça a integrina beta-3 nativa na superfície celular.
• A conjugação direta com permite coloração em uma etapa sem anticorpos secundários; portanto, inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio de receptores Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Para citometria de fluxo, faça titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para seu tipo celular específico e condições experimentais; diluições iniciais típicas variam de 1:25 a 1:200, mas o desempenho real deve ser validado empiricamente.
• Protocolos de fixação e permeabilização devem ser testados, pois podem alterar a acessibilidade do epítopo. A coloração de superfície em células vivas não fixadas é recomendada para sensibilidade máxima.
• A expressão da integrina beta-3 pode ser regulada positivamente após a ativação plaquetária; considere condições de repouso versus ativadas em seu desenho experimental.

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