Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD62E/E-Selectina Humana para FC - P16581

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da E-selectina

• A E-selectina (CD62E) é uma glicoproteína da superfície celular pertencente à família das moléculas de adesão selectinas, codificada pelo gene SELE em humanos. Também é conhecida como molécula de adesão de leucócitos endoteliais 1 (ELAM-1) e molécula de adesão de leucócitos-células endoteliais 2 (LECAM2).
• Sua principal função é mediar a adesão de neutrófilos sanguíneos ao endotélio ativado por citocinas, uma etapa essencial da resposta inflamatória. Essa interação ocorre por meio da ligação à SELPLG/PSGL1 (ligante 1 da glicoproteína P-selectina).
• Além disso, a E-selectina pode contribuir para a morfogênese capilar, sugerindo um papel além da adesão imune na angiogênese ou no desenvolvimento vascular.
• A proteína está localizada na membrana celular como uma proteína transmembrana do tipo I, com uma região extracelular contendo um domínio de lectina do tipo C na extremidade N-terminal, um domínio semelhante ao EGF e múltiplas repetições sushi (CCP/SCR).
• A E-selectina é caracterizada por vários motivos estruturais importantes, incluindo sítios de ligação ao cálcio, pontes dissulfeto e glicosilação ligada ao N. Ela requer íons metálicos, particularmente cálcio, para o reconhecimento de ligantes.
• A expressão da E-selectina é normalmente induzida nas células endoteliais por citocinas inflamatórias, como TNF-alfa e IL-1, sem expressão constitutiva na maioria dos tecidos, destacando seu papel na inflamação aguda.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 22–230) da E-selectina humana, abrangendo os domínios de lectina e semelhantes ao EGF. Isso sugere que o anticorpo provavelmente tem como alvo a região de ligação ao ligante na extremidade N-terminal, tornando-o adequado para o bloqueio ou a detecção da E-selectina expressa na superfície celular.
• Como um anticorpo monoclonal conjugado a fluoróforo, este reagente está pronto para uso em citometria de fluxo direta, sem necessidade de coloração secundária. Recomenda-se titular o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para o seu sistema celular específico.
• A expressão da E-selectina é induzível; considere estimular células endoteliais (por exemplo, HUVECs) com TNF-α ou IL-1 por 4–6 horas antes da coloração para alcançar níveis detectáveis na superfície celular.
• Inclua controles de isotipo apropriados e corantes de viabilidade para discriminar a ligação específica e excluir células mortas da análise.
• Armazene o anticorpo a 2–8 °C, protegido da luz; evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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