Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD66a/CEACAM1 para FC - P13688

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CEACAM1

• A CEACAM1 (também conhecida como BGP-1, CD66a) é uma molécula de adesão celular pertencente à família do antígeno carcinoembriônico (CEA), codificada pelo gene CEACAM1 (GeneID: 634) no cromossomo 19.
• Ela funciona como uma molécula de adesão celular homofílica independente de cálcio e como um importante receptor coinibitório nas respostas imunológicas, regulando negativamente a citotoxicidade mediada pelo receptor de células T, a proliferação e a produção de citocinas, além da citólise por células NK e a ativação de neutrófilos. Referências relacionadas: PMID:18424730 PMID:23696226 PMID:25363763
• A proteína está envolvida na sinalização da insulina, promovendo a depuração da insulina e regulando a lipogênese, além de atuar como ativador na angiogênese, aumentando a diferenciação de células endoteliais e a remodelação vascular.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; as isoformas predominantes nas células T têm um domínio citoplasmático longo essencial para a sinalização, enquanto os leucócitos expressam principalmente as isoformas 1 e 6.
• A CEACAM1 se localiza em vários domínios da membrana celular (apical, basolateral, lateral), junções aderentes, microvilosidades e membranas de vesículas secretoras; também é produzida uma forma secretada.
• É uma fosfoproteína altamente glicosilada com domínios semelhantes a imunoglobulinas e pontes dissulfeto; sua fosforilação é fundamental para recrutar fosfatases como PTPN6 (SHP-1) para mediar a sinalização inibitória.
• A expressão tecidual é proeminente em células epiteliais colunares do cólon, granulócitos e linfócitos; em células T, a expressão é regulada positivamente após a ativação.
• A CEACAM1 também desempenha papéis na inibição da agregação plaquetária, na supressão da migração celular por meio da interação com FLNA e no transporte de ácidos biliares. Referências relacionadas: PMID:16291724

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O conjugado é otimizado para citometria de fluxo; uma titração inicial de 0,5–5 µL por teste (1×10^6 células) é comumente usada, mas a diluição ideal deve ser determinada experimentalmente.
• O imunógeno (aminoácidos 35–428) corresponde ao domínio extracelular, tornando este anticorpo adequado para coloração de superfície de células vivas não fixadas.
• Células mononucleares de sangue periférico humano (PBMCs), linhas de células T (por exemplo, Jurkat) ou linhas de adenocarcinoma colorretal (por exemplo, HT-29) que expressam CEACAM1 podem ser controles positivos adequados.
• Inclua um controle de isotipo apropriado conjugado ao mesmo fluoróforo para avaliar a ligação inespecífica.
• O bloqueio do receptor Fc é recomendado ao colorir células com alta expressão de FcγR (por exemplo, monócitos, macrófagos) para reduzir o fundo.
• Para painéis multicoloridos, confirme a sobreposição espectral mínima com o usando controles de compensação.

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