Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CD84 para IF/ICC e FC - Q9UIB8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD84

• CD84 (SLAMF5) é um membro da família de receptores SLAM, que modulam as respostas imunes inata e adaptativa por meio de interações homo ou heterotípicas célula-célula.
• Ele funciona como um receptor de auto-ligante, e sua sinalização é regulada pela presença de pequenas proteínas adaptadoras citoplasmáticas SH2D1A/SAP e SH2D1B/EAT-2.
• As interações homofílicas do CD84 aumentam a secreção de interferon gama (IFNG) em linfócitos e induzem a estimulação plaquetária por via dependente de SH2D1A.
• CD84 medeia a citotoxicidade de células natural killer (NK), dependente de SH2D1A e SH2D1B (Por similaridade).
• Ele serve como marcador para células progenitoras hematopoiéticas. Referências relacionadas: PMID:11564780, PMID:12115647, PMID:12928397
• Em mastócitos, o CD84 regula negativamente a sinalização do receptor de alta afinidade da imunoglobulina E, independente de SH2D1A e SH2D1B, envolvendo FES e PTPN6/SHP-1. Referências relacionadas: PMID:22068234
• CD84 regula positivamente a macroautofagia em células dendríticas primárias ao estabilizar IRF8, inibindo sua degradação proteassômica mediada por TRIM21. Referências relacionadas: PMID:29434592
• Localização subcelular: CD84 é uma proteína de membrana celular expressa predominantemente em tecidos hematopoiéticos, incluindo linfonodo, baço, leucócitos periféricos, macrófagos, linfócitos B, monócitos, plaquetas, timócitos, linfócitos T e células dendríticas.
• A proteína sofre splicing alternativo, levando a múltiplas isoformas com pesos moleculares previstos em torno de 24 a 38 kDa. É uma glicoproteína com pontes dissulfeto e sítios de fosforilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Use diretamente para citometria de fluxo (FC) ou imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC) sem anticorpo secundário, pois o anticorpo é pré-conjugado ao .
• Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para a sua configuração experimental específica; as diluições iniciais típicas para FC são 1:50-1:200, mas confirme empiricamente.
• Para FC, inclua controle de isotipo apropriado (IgG1 de coelho ) para avaliar a ligação não específica.
• Para IF/ICC, recomenda-se fixação com paraformaldeído a 4%; a permeabilização pode não ser necessária para o CD84 de superfície celular, mas teste se a coloração intracelular for desejada.
• Valide o anticorpo em linhas de células hematopoiéticas humanas ou células imunes primárias conhecidas por expressar CD84 (por exemplo, Raji, THP-1 ou PBMCs).
• Como o anticorpo detecta múltiplas isoformas, observe que a intensidade da coloração pode variar entre os tipos de células devido à expressão diferencial de isoformas.
• Evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento; armazene a 4°C protegido da luz.

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