Coelho anti-Humano CD97 mAc para FC - P48960

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD97

• O CD97, também conhecido como receptor acoplado à proteína G de adesão E5 ou Antigénio de leucócitos CD97, é um membro da família de GPCR de adesão caracterizado por uma extremidade N extracelular estendida contendo múltiplas repetições tipo EGF.
• Funciona como um recetor envolvido tanto na adesão celular como na sinalização, desempenhando um papel essencial na migração de leucócitos.
• A proteína é expressa como isoformas transmembrana e solúveis; o splicing alternativo gera variantes com diferentes números de domínios tipo EGF.
• Localização subcelular: encontra-se principalmente na membrana celular, mas também é secretada para o espaço extracelular.
• Amplamente expresso na maioria das células hematopoiéticas (linfócitos ativados, monócitos, macrófagos, células dendríticas, granulócitos) e abundante em células musculares lisas; também encontrado em certos carcinomas (tireoide, colorretal, gástrico, esofágico, pancreático).
• A expressão é regulada positivamente em condições inflamatórias, como no SNC da esclerose múltipla e no tecido sinovial da artrite reumatoide, com aumento do CD97 solúvel detetável no líquido sinovial.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, ligações dissulfeto e fosforilação; o domínio extracelular contém locais de ligação de cálcio tipo EGF.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio utilizado foi uma proteína recombinante correspondente aos aminoácidos 21-398 do CD97 humano, abrangendo o domínio extracelular. Este design provavelmente produz anticorpos que reconhecem epítopos acessíveis na superfície.
• Para citometria de fluxo, utilize protocolos de coloração padrão com controlos de isótipo apropriados; titule o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal.
• Valide a reatividade em linhas celulares humanas hematopoiéticas ou de carcinoma relevantes conhecidas por expressarem CD97 (por exemplo, leucócitos, linhas de células musculares lisas).
• Nota que o CD97 pode ser libertado, pelo que o recetor solúvel pode competir em certos ensaios; considere o uso de células frescas ou bloqueio com proteína recombinante se necessário.
• Evite depender da determinação do peso molecular por western blot, pois este anticorpo é recomendado apenas para FC; verifique a especificidade colorindo células com padrões de expressão de CD97 conhecidos.

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