Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD99 Humano para IF/ICC e FC - P14209

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do antígeno CD99

• O antígeno CD99 (também conhecido como MIC2, antígeno E2, 12E7 ou glicoproteína de superfície de células T E2) é uma proteína transmembranar codificada pelo gene CD99 em humanos.
• Está envolvido nos processos de adesão das células T, incluindo a formação espontânea de rosetas com eritrócitos, uma característica das células T.
• O CD99 desempenha um papel fundamental na extravasação de leucócitos, facilitando a passagem dos leucócitos através da membrana basal endotelial em uma etapa tardia, atuando independentemente do PECAM1.
• A proteína está localizada na membrana plasmática (proteína de membrana do tipo I de passagem única), com sua extremidade N-terminal exposta extracelularmente.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e fosforilação (palavras-chave: glicoproteína, fosfoproteína).
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína faz parte do proteoma de referência, com evidências diretas de sequenciamento proteico.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 24-123 do CD99 humano, correspondente à região extracelular N-terminal. Esse design provavelmente tem como alvo um epítopo exposto, sendo adequado para aplicações de marcação de células vivas.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), recomenda-se a fixação com paraformaldeído, mas a permeabilização pode ser omitida se o epítopo estiver acessível na superfície celular. Teste a marcação com e sem detergente para confirmar.
• Na citometria de fluxo (FC), este conjugado permite a detecção direta; considere utilizar controles de isotipo apropriados e titular o anticorpo para obter uma relação sinal/ruído ideal.
• Valide a especificidade do anticorpo em seu sistema experimental utilizando linhagens celulares CD99-positivas (por exemplo, linhagens de células T) e controles CD99-negativos para confirmar uma reatividade cruzada mínima.
• Como o CD99 está envolvido na adesão, certifique-se de que os métodos de coleta celular não danifiquem os antígenos de superfície; recomenda-se utilizar técnicas de desprendimento suaves.

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