Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano CLEC12A/CD371 para FC - Q5QGZ9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CLEC12A

• O CLEC12A (CD371, CLL-1, MICL) é um receptor transmembrana de tipo II de passagem única da família das lectinas tipo C. O splicing alternativo produz múltiplas isoformas.
• Funciona como um receptor inibitório mieloide; após o envolvimento do ligante, o seu motivo ITIM é fosforilado, recrutando as fosfatases de tirosina PTPN6 e PTPN11 para atenuar os sinais de ativação mediados por SYK, suprimindo assim as respostas das células mieloides, incluindo a produção de citocinas e a desgranulação. Referências relacionadas: PMID:14739280, PMID:16239426, PMID:34234773
• Atua como um receptor de reconhecimento de padrões para diversos ligantes: reconhece DNA em armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs), cristais de urato monossódico e moléculas associadas a patógenos, como hemozoína de plasmódio e ácido micólico micobacteriano, ligando-o a feedback anti-inflamatório e defesa do hospedeiro. Referências relacionadas: PMID:38367667, PMID:38386511, PMID:39143217, PMID:31269448, PMID:36542980
• Inibe a citotoxicidade das células natural killer (NK) e restringe a maturação das células dendríticas de maneira dependente de IL-10, contribuindo para a homeostase imune. Referências relacionadas: PMID:15238421, PMID:16239426
• Localiza-se predominantemente na membrana celular.
• Expresso preferencialmente em tecidos linfoides e células imunes inatas/adaptativas, incluindo células NK, células T, células dendríticas, monócitos e macrófagos; detetado ao nível proteico na polpa vermelha rica em macrófagos do baço e no gânglio linfático. Referências relacionadas: PMID:14739280, PMID:15238421, PMID:15548716, PMID:16239426, PMID:16838277
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e fosforilação; o domínio extracelular contém ligações dissulfeto conservadas essenciais para a integridade estrutural.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado corresponde ao domínio extracelular (aa 65-265) do CLEC12A humano, que contém o domínio de lectina tipo C e é suficiente para gerar anticorpos que reconhecem o receptor nativo em células vivas.
• Este conjugado é otimizado para citometria de fluxo (FC) direta sem anticorpo secundário; considere titular o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para o seu tipo de célula e condições de coloração.
• Para coloração de superfície do CLEC12A, colha as células e lave com tampão FACS (PBS contendo 1–2% de FBS ou BSA). Incube com o anticorpo conjugado com fluoróforo a 2–8°C durante 20–30 minutos, protegido da luz.
• Inclua controlos de isótipo apropriados e reagentes de bloqueio de recetores Fc para minimizar a ligação não específica, especialmente em populações de células mieloides.
• A aquisição de dados deve ser realizada o mais rápido possível após a coloração; se o atraso for inevitável, fixe as células com paraformaldeído após a lavagem e proteja da luz.
• Evite ciclos repetidos de congelação-descongelação do anticorpo; armazene o conjugado não diluído a 2–8°C e proteja da exposição prolongada à luz.

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