Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano Citoceratina 8 para Citometria de Fluxo Intracelular - P05787

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Citoceratina 8

• A Queratina 8 (K8/CK8), codificada pelo gene KRT8, é uma proteína de filamento intermediário do tipo II que forma heteropolímeros obrigatórios com sua parceira do tipo I, KRT18, em células epiteliais simples (PubMed:26823019).
  Referências relacionadas: PMID:26823019
• KRT8 fornece estabilidade mecânica e resiliência aos epitélios e protege as células de estresses não mecânicos, como a apoptose (Por similaridade).
• É necessária para a formação de fibras de estresse de actina mediada por ARHGEF40 e para o reforço das fibras de estresse induzido por força tensional (PubMed:26823019).
  Referências relacionadas: PMID:26823019
• No músculo estriado, KRT8 e KRT19 podem ligar o aparelho contrátil à distrofina nos costâmeros (PubMed:16000376).
  Referências relacionadas: PMID:16000376
• A localização subcelular é predominantemente no citoesqueleto citoplasmático, mas também é detectada no nucleoplasma e na matriz nuclear.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação, metilação, ubiquitinação e glicosilação, que modulam sua montagem e função.
• Especificidade tecidual: expressa em epitélios simples (ex.: mucosa gengival, palato duro) e em fibras musculares nos costâmeros.
• Relevância clínica: associada a variantes de doenças e interações hospedeiro-vírus, destacando seu papel na patologia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo intracelular, fixe e permeabilize as células usando protocolos otimizados (ex.: PFA 4% seguido de Triton X-100 0,1% ou tampões à base de saponina) para permitir o acesso do anticorpo à rede de queratina citosólica.
• Titular o anticorpo marcado com para determinar a concentração ideal de coloração; diluições iniciais típicas estão entre 1:50 e 1:200, mas variam conforme o tipo celular.
• Use anticorpos controle de isotipo apropriados para definir os limiares de gateamento e confirmar a especificidade da coloração para KRT8.
• Células HeLa ou outras linhagens de células epiteliais simples (ex.: MCF-7) podem servir como controles positivos devido à alta expressão de KRT8; considere usar células knockout ou knockdown como controles negativos, se disponíveis.
• Proteja o anticorpo da exposição prolongada à luz para evitar o fotobranqueamento do fluoróforo durante a coloração e aquisição.
• O imunógeno abrange quase toda a extensão da KRT8 (aa 1-483), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece a conformação nativa; no entanto, a validação para outras aplicações (ex.: WB, IHC) não foi fornecida e deve ser verificada independentemente.

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