mAb Coelho anti-Humano EGFR para IF/ICC, FC - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• EGFR (receptor do fator de crescimento epidérmico) é um membro da família ErbB de receptores tirosina quinases e também é conhecido como ErbB1 ou HER1.
• Ele se liga a ligands da família EGF, incluindo EGF, TGF-alfa, amfiregulina (AREG), epigen (EPGN), betacelulina (BTC), epiregulina (EREG) e fator de crescimento semelhante a EGF ligante de heparina (HBEGF), levando à homo ou heterodimerização do receptor e autofosforilação em resíduos citoplasmáticos chave. (PubMed:10805725, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029) Referências relacionadas: PMID:10805725, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• O receptor fosforilado recruta proteínas adaptadoras como GRB2, iniciando várias cascatas de sinalização a jusante, incluindo os módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 quinase-AKT, PLCgamma-PKC e STATs. Ele também pode ativar a via de sinalização NF-kappa-B. (PubMed:27153536, PubMed:11116146) Referências relacionadas: PMID:27153536, PMID:11116146
• O EGFR fosforila diretamente outras proteínas como RGS16 (ativando sua atividade GTPase), MUC1 (potenciando sua interação com SRC e CTNNB1/beta-catenina) e CCDC88A/GIV (promovendo migração celular ao reter o EGFR na membrana celular). (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955) Referências relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• A isoforma 2 do EGFR pode atuar como um antagonista da ação do EGF.
• O EGFR se localiza em múltiplos compartimentos celulares, incluindo membrana celular, membrana do retículo endoplasmático, membrana do aparelho de Golgi, membrana nuclear, endossomos e o núcleo; também pode ser secretado.
• É expresso de forma ubíqua, com a isoforma 2 também detectada em cânceres de ovário.
• Em hepatócitos, o EGFR atua como receptor do vírus da hepatite C (HCV), facilitando a entrada viral ao promover a formação do complexo receptor CD81-CLDN1 e potenciando a fusão de membranas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo tem como alvo um epitopo do domínio extracelular (aminoácidos 335-525), sendo adequado para detecção de EGFR de superfície celular em aplicações com células vivas e células fixadas, como citometria de fluxo e imunofluorescência.
• Para citometria de fluxo, recomendamos titular o anticorpo para determinar a concentração ideal e incluir controles de isotipo adequados para garantir a especificidade.
• Para imunofluorescência, pode ser utilizada fixação suave com paraformaldeído seguida de permeabilização com Triton X-100 ou metanol; no entanto, a detecção do EGFR de superfície pode não exigir permeabilização.
• Como a reatividade cruzada foi validada apenas para o EGFR humano, os usuários devem verificar a reatividade em outras espécies ou tipos de amostra de interesse.
• Como qualquer anticorpo recombinante, realize verificações de consistência entre lotes e valide no sistema de ensaio pretendido.

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