Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano EGFR para IF/ICC, FC - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• O receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR, também conhecido como ERBB1/HER1) é uma tirosina quinase de receptor transmembrana que se liga especificamente a ligandos da família EGF (por exemplo, EGF, TGF-α, AREG, HB-EGF). A ligação ao ligante induz a dimerização e autofosforilação do receptor, iniciando a transdução de sinal intracelular.
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• O EGFR ativado aciona vários módulos de sinalização a jusante, incluindo RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STATs, controlando a proliferação, sobrevivência e diferenciação celular.
  Referências relacionadas: PMID:27153536
• O EGFR também fosforila diretamente a RGS16 (modulando a sinalização de proteína G), a MUC1 (promovendo sua interação com SRC e β-catenina), e interage com CCDC88A/GIV para promover a migração celular.
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• A isoforma 2 do EGFR, gerada por splicing alternativo, pode atuar como um antagonista da ação do EGF, contrabalançando a sinalização canônica.
• O EGFR localiza-se principalmente na membrana celular, mas sofre endocitose induzida por ligante e pode ser encontrado em endossomos, núcleo, retículo endoplasmático e aparelho de Golgi. Esse tráfego dinâmico regula a duração e especificidade do sinal.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, ubiquitinação, glicosilação e palmitoilação, ajustam finamente a atividade, estabilidade e compartimentalização do EGFR.
• Expresso ubíquamente em tecidos normais, o EGFR é frequentemente superexpresso ou mutado em cânceres; a isoforma 2 é notavelmente expressa em cânceres de ovário.
• O EGFR atua como fator de entrada do hepatite C vírus (HCV) em hepatócitos, facilitando a formação de complexos de correceptores CD81-CLDN1.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 335–525 do EGFR humano, uma região dentro do domínio extracelular de ligação ao ligante. Esse design pode conferir especificidade para a conformação nativa do receptor em aplicações de coloração de superfície celular.
• Para imunofluorescência e citometria de fluxo, as diluições de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente para cada linha celular ou tipo de tecido. Considere o uso de protocolos adequados de fixação/permeabilização para preservar a antigenicidade.
• Este anticorpo conjugado com fluoróforo elimina a necessidade de detecção secundária, reduzindo o fundo não específico e o tempo do protocolo. Valide a reatividade na amostra humana pretendida para confirmar o desempenho.

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