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Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano FAP para FC - Q12884

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Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano FAP para FC - Q12884

Número do item : CM0009346

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Aplicação
FC
Reatividade Cruzada
Humano
Peso da Proteína
27kDa/87kDa
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Parâmetro Valor
Nome do Produto Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano FAP
Observações/Apelido FAP; DPPIV; FAPA; FAPalpha; SIMP; prolyl endopeptidase FAP
Espécie Humano
GeneID (Humano) 2191
GeneID 2191
Imunogênio Proteína de fusão recombinante contendo uma sequência correspondente aos aminoácidos 26-760 da FAP humana (NP_004451.2).
Fonte Coelho
Categoria Anticorpos Monoclonais
Aplicação FC (Citometria de Fluxo)
Reatividade Cruzada Humano
SWISS Q12884
Peso Proteico 27kDa/87kDa
Transporte Em saco de gelo

Contexto Biológico: Função e Localização da Prolyl Endopeptidase FAP

  • A prolyl endopeptidase FAP (FAP) é uma glicoproteína serina protease de superfície celular, também conhecida como proteína de ativação de fibroblastos alfa, seprase e gelatinase ligada à membrana de melanoma de 170 kDa. Múltiplos isoformas existem devido ao splicing alternativo.
  • A FAP exibe atividade de endopeptidase de clivagem pós-prolina e atividade de dipeptidil peptidase. A atividade endopeptidase tem como alvo substratos com sequências Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala, como a alfa-2-antiplasmina e SPRY2. Referências relacionadas: PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248
  • A atividade de dipeptidil peptidase hidrolisa ligações prolílicas em dipeptídeos sintéticos e atua em neuropeptídeos naturais, incluindo NPY, PYY, substância P e BNP32. Referências relacionadas: PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817
  • A FAP degrada gelatina e colágeno tipo I desnaturado pelo calor, mas não colágeno nativo tipos I e IV, vitronectina, tenascina, laminina, fibronectina, fibrina ou caseína, contribuindo para a remodelação da MEC. Referências relacionadas: PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466
  • Através de suas atividades proteolíticas, a FAP regula a proteólise pericelular, promovendo adesão, migração e invasão celular. Desempenha papéis na remodelação tecidual, fibrose, cicatrização de feridas, inflamação e progressão tumoral, incluindo o aumento da angiogênese e evasão imunológica.
  • Subcelularmente, a FAP se localiza na superfície celular e na membrana, particularmente em projeções celulares como lamelipódios, invadopódios e rufos. Formas solúveis também são secretadas no espaço extracelular e detectadas no citoplasma.
  • A expressão tecidual é amplamente restrita a fibroblastos ativados em condições patológicas: feridas em cicatrização, fígado cirrótico (células estreladas hepáticas), tecidos sinoviais inflamados e estroma reativo de cânceres epiteliais. É altamente expressa em células de glioma e linhagens de melanoma, mas ausente no fígado normal. O tecido adiposo também expressa FAP.
  • Modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ligações dissulfeto, e é sintetizada como uma proteína de membrana tipo II de passagem única com uma âncora de sinal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

  • Este anticorpo é projetado para aplicações de citometria de fluxo (FC). O imunogênio abrange os aminoácidos 26-760 da FAP humana, cobrindo o domínio extracelular. O fluoróforo permite detecção direta sem reagentes secundários, reduzindo o fundo.
  • Para coloração de superfície celular de células vivas, incubar com o anticorpo no gelo em tampão de bloqueio. Para detecção intracelular ou de FAP total, considere protocolos de fixação e permeabilização.
  • A concentração ideal do anticorpo deve ser determinada por titulação no sistema celular relevante. Inclua controles de isotipo apropriados e corantes de viabilidade para excluir células mortas da análise.
  • Como a FAP é expressa em fibroblastos ativados no estroma tumoral e tecidos em cicatrização, use controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, fibroblastos associados a câncer positivos para FAP vs. fibroblastos de tecido normal ou linhagens celulares negativas para FAP).
  • Devido ao potencial de liberação (shedding), formas secretadas de FAP podem estar presentes no sobrenadante; para coloração de superfície precisa, lave as células minuciosamente antes da coloração.

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Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano FAP para FC - Q12884


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