Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano Flt3/CD135 para Citometria de Fluxo - P36888

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Flt3/CD135

• Codificada pelo gene FLT3, a tirosina proteína quinase do receptor FLT3 (também conhecida como CD135, FLK-2, FLK2, STK1) é um receptor de superfície celular pertencente à família III de receptores de tirosina quinase.
• Atua como receptor para a citocina FLT3LG, desempenhando um papel crítico na regulação da diferenciação, proliferação e sobrevivência de células progenitoras hematopoiéticas e células dendríticas.
• Ao ligar o ligante, o FLT3 ativa vias de sinalização a jusante, incluindo RAS/MAPK, PI3K/AKT/mTOR e STAT5, através da fosforilação de proteínas adaptadoras e quinases como SHC1, AKT1, MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1 e STAT5A/B.
• Mutações que causam atividade constitutiva da quinase estão associadas a malignidades hematológicas, pois promovem a proliferação celular descontrolada e a resistência à apoptose.
• Localiza-se principalmente na membrana celular como uma proteína transmembrana de passagem única, com seu domínio de ligação ao ligante exposto extracelularmente e o domínio da quinase intracelularmente; também detectada no lúmen do retículo endoplasmático.
• Altamente expresso na medula óssea, células-tronco hematopoiéticas, células progenitoras mieloides e células progenitoras de granulócitos/macrófagos; também encontrado no fígado, timo, baço, linfonodo e em níveis mais baixos no rim e pâncreas; notavelmente superexpresso na leucemia de células T.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação, que regulam sua estabilidade, localização e atividade.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, potencialmente influenciando a função do receptor e os padrões de expressão específicos do tecido.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal é projetado para aplicações de citometria de fluxo (FC). Realize experimentos de titulação para determinar a concentração ideal para o seu tipo de célula e configuração do ensaio.
• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 27-163), indicando que o anticorpo tem como alvo a região extracelular do FLT3. Use controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio de receptores Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Como o FLT3 é expresso em células progenitoras hematopoiéticas e células dendríticas, considere o uso de controles positivos (por exemplo, linhagens de células leucêmicas) e negativos validados ao configurar o seu painel de citometria de fluxo.
• A conjugação direta com elimina a necessidade de um anticorpo secundário, simplificando o protocolo de coloração e potencialmente reduzindo o fundo.

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