Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano HER2/ErbB2 para Citometria de Fluxo - P04626

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de HER2/ErbB2

• HER2/ErbB2 é uma tirosina-proteína quinase receptora que funciona dentro de complexos de receptores de superfície celular, exigindo um co-receptor para ligação ao ligante. É um componente essencial do complexo receptor de neuregulina, embora as neuregulinas não interajam diretamente com ele.
• A proteína regula o crescimento e estabilização dos microtúbulos via o eixo de sinalização MEMO1-RHOA-DIAPH1, que inibe GSK3B e promove a localização na membrana de APC e MACF1, críticos para a captura dos microtúbulos.
• No núcleo, o HER2 atua como um regulador transcricional: liga-se ao promotor de PTGS2/COX-2 para ativar a transcrição e participa na ativação transcricional de CDKN1A em conjunto com STAT3 e SRC.
• Também está envolvido na transcrição de genes de rRNA pela RNA polimerase I, melhorando assim a síntese proteica e o crescimento celular.
• Subcelularmente, o HER2 localiza-se na membrana celular, membrana de rufos, endossomos iniciais, citoplasma (região perinuclear) e núcleo, refletindo seus papéis duplos de sinalização e transcrição.
• A expressão é observada em vários tecidos tumorais, incluindo câncer de mama primário, intestino delgado, esôfago, rim e câncer oral, ressaltando sua importância oncogênica.
• Características estruturais-chave incluem um peptídeo sinal, um grande domínio extracelular, uma única hélice transmembrana e um domínio tirosina quinase intracelular. Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, glicosilação e formação de ligações dissulfeto.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é adequado para citometria de fluxo (FC) e reconhece o domínio extracelular do HER2 humano. Use linhagens celulares HER2-positivas apropriadas (por exemplo, SK-BR-3, BT-474) para controle positivo e linhagens HER2-negativas (por exemplo, MCF-7) como controle negativo.
• Para coloração de superfície celular, colha células vivas e realize a coloração sem fixação/permeabilização para preservar o epítopo extracelular. Inclua um controle de isotipo e bloqueio de Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Titular o anticorpo para determinar a concentração ideal para suas condições específicas de ensaio; concentrações iniciais típicas variam de 0,1–1 µg por teste.
• Como o imunógeno abrange os aminoácidos 23–652, o anticorpo pode não detectar isoformas que faltam nesta região ou aquelas com truncamentos N-terminais. Valide a expressão em seu sistema celular alvo se estiver usando isoformas alternativas.
• Proteja o conjugado da exposição prolongada à luz para manter a estabilidade da fluorescência. Armazene o anticorpo conforme recomendado e evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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