Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano IgG (Fc) Conjugado a para Citometria de Fluxo - P01857

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IgG (Fc)

• O alvo é a região constante (Fc) da cadeia pesada da imunoglobulina gama-1 humana (IgG1), codificada pelo gene IGHG1, correspondente aos aminoácidos 100-330 da proteína madura (UniProt P01857). Esta região media funções efetoras através da interação com receptores Fc e complemento.
• As cadeias pesadas de imunoglobulina são integrantes da imunidade adaptativa: a Ig ligada à membrana serve como receptor de células B, enquanto os anticorpos secretados neutralizam patógenos. A região Fc da IgG1 especificamente desencadeia citotoxicidade celular dependente de anticorpo, citotoxicidade dependente de complemento e fagocitose (PubMed:17576170, PubMed:20176268, PubMed:22158414). Referências relacionadas: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• A IgG1 consiste em duas cadeias pesadas idênticas ligadas por dissulfeto a duas cadeias leves; cada cadeia pesada contém um domínio variável (codificado por segmentos V, D, J) e três domínios constantes (CH1, CH2, CH3). Os domínios CH2 e CH3 formam o fragmento Fc alvo deste anticorpo.
• O gene IGHG1 faz parte do locus da cadeia pesada de imunoglobulina no cromossomo 14, e a recombinação de troca de classe de IgM/IgD para IgG1 ocorre em células B ativadas, moldando o repertório de anticorpos.
• A IgG1 é o isotipo de anticorpo mais abundante no soro humano e é crucial para a imunidade humoral de longo prazo, frequentemente usado como arcabouço para anticorpos terapêuticos.
• Localização subcelular: as cadeias pesadas da IgG1 são secretadas como anticorpos ou exibidas na superfície de células B como imunoglobulinas ligadas à membrana (forma transmembrana).
• Modificações pós-traducionais incluem formação de ligações dissulfeto e N-glicosilação no domínio CH2 conservado, essencial para a ligação ao receptor Fc e estabilidade.
• Palavras-chave: imunidade adaptativa, secretado, membrana celular, glicoproteína, domínio de imunoglobulina, ligação dissulfeto.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo está conjugado ao , um fluoróforo fotostável com máximos de excitação/emissão ~590/617 nm, compatível com citômetros de fluxo padrão. Certifique-se de configurações e compensação apropriadas do instrumento.
• Para citometria de fluxo, faça titulação do anticorpo para determinar a concentração ótima de coloração (tipicamente 0,5-5 µg por 10^6 células) usando células controle positivas e negativas expressando IgG humana (por exemplo, células B humanas ou linhagens celulares expressando IgG de membrana).
• Como o anticorpo reconhece a região Fc, ele pode se ligar a IgG livre no soro ou meio de cultura; lave as células minuciosamente para reduzir o fundo.
• Este clone pode ser usado para detectar IgG de superfície em células B humanas, ou para identificação de partículas revestidas com IgG ou complexos imunes em configurações de pesquisa.
• Evite fixação/permeabilização agressiva que possa alterar o epítopo Fc; fixação suave com paraformaldeído (1-4%) é geralmente compatível.
• Use reagentes bloqueadores de receptores Fc ao colorir células com alta expressão de FcγR para prevenir ligação inespecífica.
• Considere validar a reatividade cruzada com outras subclasses de IgG (IgG2, IgG3, IgG4) se necessário, pois as sequências da região Fc compartilham alta homologia.

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