mAb Coelho anti-IL-1β Humano para Citometria de Fluxo Intracelular - P01584

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Interleucina-1 beta

• IL-1β (Interleucina-1 beta, também conhecida como Catabolina) é uma citocina pró-inflamatória potente e membro da família das interleucinas-1. É codificada pelo gene IL1B em humanos (ID do Gene: 3553).
• A IL-1β atua como um pirogênio endógeno chave, induzindo a síntese de prostaglandinas, influxo e ativação de neutrófilos, estimulação de células T e B, além de proliferação de fibroblastos e produção de colágeno. Referências relacionadas: PMID:3920526
• Ela promove a diferenciação de Th17 e atua em sinergia com a IL-12 para induzir a síntese de IFN-γ por células Th1. Referências relacionadas: PMID:10653850
• A IL-1β contribui para a angiogênese ao induzir a produção de VEGF em sinergia com TNF e IL-6. Referências relacionadas: PMID:12794819
• Após a ativação do inflamassoma e a piroptose, a IL-1β madura é liberada através dos poros de gasdermina-D (GSDMD), desempenhando um papel crítico na transdução da inflamação a jusante da morte celular. Referências relacionadas: PMID:33377178 PMID:33883744
• Durante a infecção cutânea por Streptococcus pyogenes, a IL-1β atua como um sensor: ela é clivada e ativada pela protease bacteriana SpeB, desencadeando uma resposta inflamatória que limita o crescimento bacteriano. Referências relacionadas: PMID:28331908
• Subcelularmente, a IL-1β encontra-se no citoplasma, no citosol, nos lisossomos e é secretada para o espaço extracelular, inclusive via exossomos.
• Ela é expressa principalmente em monócitos e macrófagos ativados no nível proteico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à IL-1β madura (aa 117-269), o que indica que o anticorpo pode detectar tanto a forma pró quanto a forma clivada. Para citometria de fluxo intracelular, garanta uma fixação e permeabilização completas.
• Otimize as condições de permeabilização (por exemplo, saponina ou metanol) para preservar a acessibilidade do epítopo, permitindo ao mesmo tempo a entrada do anticorpo. Inclua um corante de viabilidade para excluir células mortas, se necessário.
• Valide o anticorpo no seu contexto celular específico estimulando com ativadores conhecidos do inflamassoma (por exemplo, LPS + ATP) e comparando com controles não estimulados.
• Realize um experimento de titulação para determinar a concentração ideal do anticorpo, equilibrando o sinal específico com o fundo em células permeabilizadas.
• Este anticorpo é específico para a IL-1β humana; a reatividade cruzada com a IL-1β de camundongo ou rato não é esperada com base na sequência do imunógeno, mas deve ser verificada se utilizado em outras espécies.

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