Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano IL-6R/CD126 Conjugado a para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P08887

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IL-6R/CD126

• A subunidade alfa do receptor de interleucina-6 (IL-6R, CD126/gp80) é uma glicoproteína transmembrana que existe como uma forma ligada à membrana e uma isoforma solúvel (sIL6R) gerada por splicing alternativo e clivagem proteolítica.
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• O IL-6R ligado à membrana se liga à interleucina-6 (IL-6) com baixa afinidade; a transdução de sinal requer associação com o co-receptor gp130 para ativar as vias JAK/STAT, MAPK e outras, regulando respostas imunes, reações de fase aguda e hematopoiese. A sinalização clássica via IL-6R de membrana é predominantemente regenerativa e anti-inflamatória, com expressão restrita principalmente a hepatócitos e certos subconjuntos de leucócitos.
  Referências relacionadas: PMID:28265003, PMID:30995492, PMID:31235509

• O IL-6R solúvel (sIL6R) atua como um agonista formando um complexo IL-6:sIL6R que se liga ao gp130 em células que carecem de IL-6R de membrana, permitindo a sinalização trans da IL-6. A sinalização trans é pró-inflamatória, contribui para doenças inflamatórias crônicas, induz a produção de VEGF e regula a homeostase energética e da glicose no sistema nervoso central.
  Referências relacionadas: PMID:21990364, PMID:12794819

• Na sinalização em cluster, complexos IL-6:IL-6R ligados à membrana em uma célula ativam o gp130 em células adjacentes; este modo é usado por células dendríticas para promover a diferenciação Th17 de células T CD4⁺ naive.

• O IL-6R é expresso em mononucleares de sangue periférico e hepatócitos; sIL6R é detectável em baixos níveis no soro e na urina. Aproximadamente 1–20% do sIL6R no plasma tem origem no splicing alternativo.
  Referências relacionadas: PMID:28060820

• A região extracelular contém domínios semelhantes à imunoglobulina e um módulo de homologia do receptor de citocina, estabilizado por ligações dissulfeto. A proteína sofre N-glicosilação, importante para a ligação do ligante e estabilidade do receptor.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 20–358); o anticorpo pode reconhecer tanto o IL-6R ligado à membrana quanto o sIL6R. Para citometria de fluxo intracelular, otimize a fixação e permeabilização para capturar pools intracelulares do receptor, minimizando o fundo das formas solúveis.
• Recomendamos incluir controles de nocaute ou silenciamento de IL-6R para confirmar a especificidade da coloração em seu sistema experimental.
• O conjugado direto elimina etapas de anticorpo secundário e reduz o tempo do ensaio; no entanto, a titulação é aconselhada para obter o melhor sinal-ruído em seu modelo celular específico.
• Como o sIL6R pode estar presente em sobrenadantes de cultura ou fluidos corporais, garanta uma lavagem completa após a coloração para remover complexos solúveis de receptor-anticorpo não ligados.

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