Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano Integrina-β1/CD29 para FC - P05556

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Integrina beta-1

• A integrina beta-1 (ITGB1, CD29) é um recetor de adesão celular ubíquo que heterodimeriza com pelo menos 12 subunidades alfa diferentes, formando integrinas que se ligam ao colagénio, fibronectina, laminina, vitronectina e outros componentes da matriz extracelular.
• O heterodímero ITGA5:ITGB1 atua como recetor para a fibronectina FN1 e medeia a adesão celular dependente de R-G-D à FN1. Referências relacionadas:
  PMID:33962943
• A ITGB1 serve como co-recetor de sinalização: a ITGA4:ITGB1 liga-se à fractalquina (CX3CL1) e participa na sinalização dependente de CX3CR1; a ITGA5:ITGB1 atua como recetor para IL1B, essencial para a sinalização de IL1B; e a ITGA5:ITGB3 liga-se à CD40LG solúvel, necessária para a sinalização CD40/CD40LG. Referências relacionadas:
  PMID:23125415
  PMID:24789099
  PMID:29030430
  PMID:31331973
• A proteína está localizada na membrana celular e enriquecida em estruturas de adesão: adesões focais, invadopódios, lamelipódios, ruffles e o sulco de clivagem; também trafega através de endossomas de reciclagem.
• A ITGB1 é amplamente expressa em muitos tecidos, com níveis mais elevados na placenta, músculo liso, pele, fígado e várias células hematopoiéticas; o splicing alternativo gera isoformas com expressão restrita, como no músculo estriado e células T periféricas.
• Vários patógenos microbianos exploram a ITGB1 para entrada no hospedeiro: atua como recetor para ecovírus humanos, citomegalovírus, vírus Epstein-Barr, parvovírus B19, rotavírus, reovírus e HIV-1, e interage com adesinas bacterianas e fúngicas, incluindo a N. meningitidis nadA e as proteínas CotH causadoras de mucormicose. Referências relacionadas:
  PMID:32487760
• Modificações pós-traducionais, incluindo N-glicosilação, fosforilação em múltiplos resíduos, acetilação e ubiquitinação, modulam a estabilidade, ativação e tráfego subcelular da ITGB1.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio cobre os aminoácidos 1-728 terminais N do domínio extracelular da ITGB1 humana, favorecendo o reconhecimento de epítopos expostos na superfície; isto torna o anticorpo adequado para citometria de fluxo em células vivas sem permeabilização.
• Para FC, titule o conjugado para a concentração ótima usando o seu tipo de células alvo; inclua um controlo de isotipo e, se necessário, uma etapa de bloqueio de recetores Fc para minimizar o fundo.
• Devido à ITGB1 ser altamente expressa na maioria dos leucócitos e muitas células aderentes, confirme a expressão na sua população alvo com um controlo positivo conhecido, como células Jurkat ou monócitos THP-1.
• A conjugação direta elimina a necessidade de um anticorpo secundário; certifique-se de que o seu citómetro está equipado com um laser de 488 nm e filtros de emissão apropriados (por exemplo, 530/30 nm) para a deteção do .
• Para coloração de células aderentes, considere usar uma dissociação suave (por exemplo, tampão de dissociação não enzimático) para preservar a integridade da integrina de superfície, pois a tripsina pode clivar o domínio extracelular.

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