Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano KIR2DL2/KIR2DL3 para IF/ICC e FC - P43628

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KIR2DL2/KIR2DL3

• As proteínas alvo KIR2DL2 e KIR2DL3 são membros da família de receptores de imunoglobulina tipo célula assassina (KIR). Os seguintes detalhes funcionais derivam da caracterização do KIR2DL3 (UniProt P43628).
• O KIR2DL3, também conhecido como CD158b, NKAT2 e receptor NK p58, é um receptor inibitório expresso em células assassinas naturais (células NK).
• Liga-se especificamente aos alelos HLA-C (HLA-Cw1, HLA-Cw3 e HLA-Cw7), suprimindo assim a atividade das células NK e prevenindo a lise da célula alvo.
• O receptor é uma proteína transmembrana localizada na membrana celular, classificada como uma glicoproteína de membrana tipo I de passagem única com base nas suas características estruturais.
• Estruturalmente, contém domínios semelhantes a imunoglobulinas e requer ligações dissulfeto para o dobramento adequado, conforme indicado pelas suas palavras-chave proteicas.
• O splicing alternativo do gene KIR2DL3 produz múltiplas isoformas, que podem apresentar variações na especificidade do ligando ou na capacidade de sinalização.
• Além disso, sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, o que é comum entre os recetores imunes e influencia a expressão na superfície celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio compreende o domínio extracelular (aa 22-245) do KIR2DL3, que é provável que apresente epítopos nativos adequados para o reconhecimento de KIR2DL2 e KIR2DL3 na superfície celular.
• Para citometria de fluxo (FC), o conjugado direto elimina a necessidade de detecção com anticorpo secundário, reduzindo o ruído de fundo e simplificando o protocolo de coloração. Certifique-se de uma compensação adequada quando combinado com outros fluoróforos.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), as etapas de fixação e permeabilização devem ser otimizadas com base na localização da membrana plasmática do alvo. A coloração sem permeabilização pode ser usada para detectar recetores localizados na superfície.
• Dada a expressão restrita do recetor em células NK e alguns subconjuntos de células T, use um controlo positivo relevante, como células mononucleares de sangue periférico humano (PBMCs) ou linhagens de células NK, para validação inicial.
• O desempenho do anticorpo pode variar com diferentes métodos de preparação da amostra; titule o anticorpo (por exemplo, 0,1-1 µg/mL) para determinar a concentração de trabalho ideal para o seu ensaio específico.
• A reatividade cruzada com o KIR2DL2 humano é esperada com base na homologia da sequência; no entanto, confirme a especificidade no seu modelo de sistema usando controlos de knockout ou knockdown apropriados, se necessário.

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