Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Megalin/LRP2 Humana para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P98164

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Megalin/LRP2

• A Megalin, também conhecida como LRP2 ou gp330, é um grande receptor transmembranar (521 kDa) pertencente à família dos receptores de lipoproteínas de baixa densidade, codificado pelo gene LRP2 em humanos.
• Ela funciona como um receptor endocítico multiligante, atuando em conjunto com a cubilina para mediar a depuração de uma ampla variedade de ligantes, incluindo lipoproteínas, vitaminas, hormônios e fármacos, a partir do filtrado glomerular e de outros fluidos extracelulares.
• No túbulo proximal renal, a megalin medeia a reabsorção de moléculas essenciais, como 25-hidroxivitamina D3, proteína P de selenoproteína, mioglobina e complexos de metaloproteinase de matriz 2, contribuindo para a homeostase renal.
• Ela desempenha um papel crítico no processamento renal de metais pesados ao internalizar cádmio ligado à metalotioneína e outros metais tóxicos, um processo apoiado por evidências experimentais. Referências relacionadas: PMID:15126248
• A Megalin também internaliza a proteína antiapoptótica survivina/BIRC5, o que pode proteger as células renais contra danos durante isquemia ou lesão. Referências relacionadas: PMID:23825075
• Além do rim, a megalin é expressa em epitélios absortivos, incluindo a placenta e o plexo coroide, onde medeia o transporte de leptina através da barreira hematoencefálica e facilita a captação de vitaminas ligadas a hormônios.
• Subcelularmente, a megalin está localizada na membrana celular apical, nas depressões revestidas por clatrina e nos endossomos, sendo também detectada em projeções celulares neuronais, como dendritos e axônios, destacando seu papel na sinalização neuroepitelial.
• As palavras-chave associadas à megalin incluem endocitose, glicoproteína, surdez, neurogênese e variante da doença, refletindo sua ampla importância fisiológica e sua relação com patologias humanas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região intracelular da megalin humana (aminoácidos 4446–4655), tornando este anticorpo adequado para citometria de fluxo intracelular após a permeabilização celular.
• Otimize os protocolos de fixação e permeabilização para o seu tipo celular específico, a fim de garantir o acesso do anticorpo ao epítopo citoplasmático.
• Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração; as diluições iniciais típicas podem ser determinadas utilizando células de controle positivo, como células epiteliais do túbulo proximal renal ou citotrofoblastos placentários.
• Valide a especificidade utilizando linhagens celulares com redução de LRP2 ou linhagens celulares negativas para confirmar a ligação inespecífica mínima.
• Observe que o conjugado é fotoestável e brilhante, mas evite a exposição prolongada à luz e utilize conjuntos de filtros apropriados para a detecção.

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