Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Megalin/LRP2 Humano para IF-P e FC (intra) - P98164

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Megalin/LRP2

• A Megalin (LRP2) é uma glicoproteína transmembrana do tipo I de 521 kDa, pertencente à família dos receptores de lipoproteína de baixa densidade, contendo múltiplas repetições de ligação a ligantes e domínios semelhantes ao EGF.
• Funciona como um receptor endocítico multiligante, principalmente na superfície apical das células epiteliais, mediando a captação de lipoproteínas, vitaminas, hormônios e fármacos em cooperação com a cubilina.
• Medeia a endocitose e o transporte de leptina através da barreira hematoencefálica e no interior das células neuronais, contribuindo para a sinalização hipotalâmica da leptina e a regulação do peso corporal (por similaridade).
• No rim, medeia a reabsorção renal da 25-hidroxivitamina D3 ligada a GC/DBP e elimina metais pesados ligados à metalotioneína. Referências relacionadas: PMID:15126248
• Desempenha um papel crucial na homeostase renal ao internalizar a selenoproteína SEPP1 para a captação de selênio e a proteína antiapoptótica BIRC5/survivina para a integridade funcional. Referências relacionadas: PMID:23825075
• A localização subcelular inclui a membrana celular apical, o lúmen dos endossomos e as cavidades revestidas; também está presente em dendritos e axônios neuronais, indicando funções no transporte polarizado.
• É essencial para o desenvolvimento embrionário, incluindo o fechamento do tubo neural por meio da captação mediada pelo receptor de folato e da regulação da sinalização de sonic hedgehog.
• É expressa predominantemente em epitélios absortivos, como os túbulos proximais renais e os citotrofoblastos placentários, com implicações no transporte de nutrientes e hormônios esteroides.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio citoplasmático C-terminal (aa 4446-4655), tornando o anticorpo adequado para detectar epítopos intracelulares após a permeabilização.
• Para imunofluorescência (IF-P), assegure uma permeabilização adequada (por exemplo, com Triton X-100) para permitir o acesso do anticorpo ao domínio intracelular.
• Para citometria de fluxo intracelular (FC intra), otimize as etapas de fixação e permeabilização para preservar a antigenicidade; considere o uso de um marcador do envelope nuclear para a definição das regiões de análise.
• O anticorpo apresenta reação cruzada com a Megalin de camundongo, permitindo estudos em modelos murinos; no entanto, realize uma validação inicial no tecido ou tipo celular específico de interesse.
• Devido ao grande tamanho da proteína (521 kDa), confirme a especificidade utilizando controles de silenciamento (siRNA), nocaute ou peptídeo bloqueador.
• Combine com anticorpos anti-cubilina para estudos de colocalização, pois ambos os receptores estão envolvidos em processos endocíticos no túbulo proximal.

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