Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano NT5E/CD73 para FC - P21589

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de NT5E/CD73

• NT5E/CD73 é uma ecto-5'-nucleotidase que catalisa a hidrólise de AMP em adenosina, desempenhando um papel fundamental na sinalização purinérgica e na geração de adenosina.
• Apresenta especificidade de substrato por monofosfatos de ribonucleotídeos em relação às formas desoxirribose, com atividade contra IMP, UMP, GMP, CMP, dAMP, dCMP, dTMP, NAD e NMN. Referências relacionadas: PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347, PMID:34403084
• É ancorado à superfície celular através de um resíduo GPI, localizando-se exclusivamente na membrana celular.
• O sítio ativo requer ligação de zinco, e a proteína forma ligações dissulfeto importantes para a estabilidade estrutural.
• Múltiplos isoformas são produzidos por splicing alternativo, potencialmente modulando a atividade enzimática ou a localização.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada, que pode afetar o dobramento e a função da proteína.
• Variantes genéticas em NT5E estão associadas à calcificação de articulações e artérias (CALJA) e outras condições patológicas, conforme indicado pela palavra-chave "Variante de Doença".

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é uma proteína de fusão recombinante contendo os aminoácidos 27–547 do NT5E/CD73 humano, correspondendo a todo o domínio extracelular. Este projeto visa ao epítopo nativo exposto na superfície.
• Para citometria de fluxo (FC), faça titulação do anticorpo para estabelecer a diluição ideal para o seu tipo celular e protocolo de coloração. Inclua um controle de isotipo e, se possível, uma linhagem celular controle positiva conhecida por expressar CD73.
• Dado que o CD73 é ancorado por GPI, considere o potencial de liberação ou derramamento no sobrenadante sob certas condições; inclua controles apropriados para garantir coloração específica da superfície.
• Como este anticorpo está diretamente conjugado ao , elimina a necessidade de um anticorpo secundário, simplificando o protocolo e reduzindo o fundo.
• Como com qualquer anticorpo, a validação no contexto biológico relevante é recomendada, especialmente ao investigar populações celulares raras ou níveis baixos de expressão.

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