Coelho anti-Humano Fosfo-PI3K p85α (Y467)/p85β (Y464)/p55γ (Y199) Anticorpo Monoclonal para Citometria de Fluxo Intracelular - P27986 / O00459 / Q92569

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização das Subunidades Reguladoras do PI3K (p85α/p85β/p55γ)

• A subunidade reguladora p85α da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K) (codificada por PIK3R1) é uma proteína adaptadora que desempenha um papel crítico na mediação da ativação da via de sinalização PI3K/AKT. Contém domínios SH2 e SH3 que se ligam a resíduos de tirosina fosforilados em quinases de receptor de tirosina ativadas e proteínas adaptadoras, recrutando a subunidade catalítica p110 para a membrana plasmática para produzir PIP3 e propagar sinais a jusante. Referências relacionadas: PMID:17626883, PMID:19805105, PMID:7518429
• Este anticorpo foi concebido para reconhecer as formas fosforiladas de três subunidades reguladoras do PI3K: p85α (PIK3R1), p85β (PIK3R2) e p55γ (PIK3R3), especificamente nos locais conservados de fosforilação de tirosina Y467 (p85α), Y464 (p85β) e Y199 (p55γ). Estes eventos de fosforilação estão associados à ativação da sinalização do PI3K a jusante dos receptores de fatores de crescimento.
• A p85α é necessária para a captação de glicose estimulada por insulina e para a síntese de glicogénio em tecidos sensíveis à insulina e desempenha um papel na sinalização em resposta a vários receptores de fatores de crescimento (por exemplo, FGFR, KIT, PDGFR). Também modula a resposta celular ao stress ER, promovendo a translocação nuclear do isoforma 2 do XBP1, contribuindo assim para a melhoria da tolerância à glucose. Referências relacionadas: PMID:20348923
• A nível subcelular, a p85α localiza-se predominantemente no citoplasma, onde interage com receptores ligados à membrana após estimulação.
• O isoforma 2 da p85α apresenta expressão específica de tecido, estando presente no músculo esquelético e no cérebro, e em níveis mais baixos no rim e no músculo cardíaco. Ao nível proteico, os isoformas 2 e 4 são detetados no músculo esquelético.
• As principais modificações pós-traducionais incluem a fosforilação em resíduos de tirosina e serina/treonina, acetilação e ubiquitinação, que regulam a sua estabilidade e interação com parceiros de sinalização. A p85α também está envolvida em interações hospedeiro-vírus.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para a citometria de fluxo de fosfo-intracelular, considere a utilização de protocolos de fixação/permeabilização otimizados para a preservação de epítopos fosforilados. A pré-incubação com inibidores de fosfatases pode melhorar a estabilidade do sinal.
• Valide a coloração com controlos positivos e negativos apropriados (por exemplo, células humanas não tratadas vs. estimuladas por fatores de crescimento) para confirmar a especificidade fosfo.
• Como este anticorpo está conjugado diretamente com , realize experiências de titulação para determinar a concentração ótima para o seu tipo de células e condições experimentais.
• Certifique-se de que o fluoróforo escolhido é compatível com o seu painel de citometria de fluxo e configuração do instrumento.

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