mAb coelho anti-RANKL/CD254 humano - O14788

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RANKL/CD254

• O membro 11 da superfamília dos ligantes do fator de necrose tumoral (TNFSF11), também conhecido como RANKL, OPGL, ODF, TRANCE e CD254, é uma proteína transmembrana do tipo II que pertence à família dos ligantes do TNF.
• Como regulador chave do metabolismo ósseo, o RANKL se liga ao TNFRSF11A/RANK para promover a diferenciação e ativação de osteoclastos, enquanto a interação com o receptor isca TNFRSF11B/OPG inibe esse processo. Ele induz a osteoclastogênese por meio de oscilações de Ca²⁺ e transcrição gênica mediada por NFATC1.
• O RANKL pode desempenhar um papel no aumento da reabsorção óssea na hipercalcemia humoral maligna, destacando seu envolvimento na perda óssea patológica. Referências relacionadas: PMID:22664871
• Além do sistema ósseo, o RANKL atua no sistema imunológico aumentando a proliferação de células T virgens induzida por células dendríticas, sugerindo um papel nas interações entre células T e células dendríticas e nas respostas imunes dependentes de células T.
• Subcelularmente, o RANKL é encontrado na membrana celular com topologia transmembrana, no citoplasma, e também é secretado como forma solúvel (sRANKL) gerada por splicing alternativo ou descamação proteolítica.
• Sua expressão é mais alta nos linfonodos periféricos, com níveis mais baixos no baço, leucócitos do sangue periférico, medula óssea, coração, placenta, músculo esquelético, estômago e tireoide.
• As modificações pós-traduccionais incluem glicosilação, e a proteína está associada a processos de desenvolvimento, diferenciação celular e variantes de doença ligadas à osteopetrose.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo intracelular (FC intra), otimize os protocolos de permeabilização e fixação para garantir o acesso do anticorpo ao RANKL citoplasmático, preservando a integridade do epítopo.
• Inclua controles negativos adequados, como anticorpo de isotipo correspondente ou células com expressão de TNFSF11 reduzida por knockdown, para confirmar a especificidade da coloração.
• Como o RANKL pode ser ligado à membrana ou secretado, avalie a expressão em linhas celulares ou células primárias conhecidas por expressar RANKL, como células T ativadas ou osteoblastos.
• Valide o desempenho do anticorpo no seu sistema de amostra específico, pois a acessibilidade do epítopo pode variar de acordo com as condições de fixação e permeabilização.

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